黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲霉毒素的存在，因为黄曲霉毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉毒素b类具有蓝色荧光，g类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(b1,b2,g1,g2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉毒素m，其中毒性高的m的代谢物为4－羟基化的产物bs.黄曲霉毒素m1是黄曲霉毒素b1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。其危害巨大，人类日常消费食品中如牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素m1污染的食品之一。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。毒性是as2o3的100倍其实主要是指黄曲霉毒素比as2o3毒。
目前来讲，aflatoxinm1的检测方法有液相色谱法(hplc)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素m1elisa试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素m1残留。
作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商， 2010年泰乐祺科技投巨资成立了检测应用实验室，重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等检测技术问题，以期望快速提出解决方案。近期应针对奶中出现的黄曲霉毒素m1超标问题，泰乐祺科技提供了两种检测方案，可以帮助企业轻松应对奶中黄曲霉毒素m1的*检测。
液相色谱法：
根据国标《gb 5413.37—2010》食品安全标准乳和乳制品中黄曲霉毒素m1 的测定
　实验用前处理：
实验仪器和好耗材包括：
恒温水浴锅　溶剂过滤器(带真空泵)1000ml 高速匀质器 黄曲霉毒素免疫m1亲和柱玻璃纤维滤纸 玻璃注射器 无荧光特性玻璃试管 空气压力泵 超声波清洗机 定量滤纸 量筒 样品瓶 容量瓶 移液器或移液管
实验用试剂：色谱乙腈色谱甲醇 氢氧化钠 石油醚 超纯水或去离子水等等
hplc条件：
液相色谱仪
色谱柱
c18柱，150*4.6mm，5um
流动相
乙腈－水（25：75）
荧光检测器：
激发波长365nm，发射波长435nm；
柱 温
室温
流速
1.0ml/min
进样量
20ul
出峰时间
10分钟左右
样品取样：真菌毒素分析的大误差来源是样品的收集和取样过程，所以必需保证样品收集和取样具有代表性。
样品前处理：分不同样品
牛奶水浴加热至40度，离心用上清液过柱净化；
乳粉和粉状婴幼儿配方食品：称取适量奶粉样品，用于蒸馏水中，混合均匀使其充分溶解，离心离心用上清液过柱净化；
发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型)：称取适量奶粉样品，用于蒸馏水中，调节ph值至微碱性，高速均质器匀浆，水浴加热后离心，取上清液混合均匀使其充分溶解，离心离心用上清液过柱净化；
干酪：称取适量切细或粉碎，过筛用加纯水溶解，高速均质器匀浆，超声提取后收集上清液，然后用石油醚进行两次萃取，然后用适宜的有机溶液萃取，取若干上清液过柱净化
奶粉样品，用于蒸馏水溶解中，调节ph值至微碱性，水浴加热后离心，取上清液混合均匀使其充分溶解，离心离心用上清液过柱净化；
奶油：称取适量加甲醇水溶解，震荡后分页漏斗取下层溶液，蒸干后溶于水用于过柱净化。
免疫柱净化步骤：*符合gb/t 18980-2003
┅┅取出免疫亲和层析柱, 恢复至室温，将上方塞子取出斜剪断，再插回亲和柱上。
┅┅将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下。准确移取清澈液注入玻璃注射器；
┅┅将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约2-3ml/min流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3ml空气通过柱体；
┅┅更换玻璃注射器与亲和柱连接，在注射器中加入10ml水，调节压力使水以约6ml/min流速清洗亲和柱。
┅┅准确加入4ml色谱级乙腈洗脱，流速为1 ml/min ~2ml/min，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测。
注：收集管中的洗脱液即为纯化后的样品，可直接用elisa,荧光和液相等方法检测。
hplc 检测需要仪器与耗材
产品名称
说明
规格
黄曲霉毒素m1固体标准品
参比对照使用
100ug 1mg
黄曲霉毒素m1液体标准品
浓度0.5ug/ml, 溶于乙腈
1ml
pribofast 黄曲霉毒素m1免疫亲和柱
用于 样品前处理柱 分析黄曲霉毒素
25/50t
pribofast泵流操作架（8位）
用于免疫亲和柱净化样品处理，方便控制流速
黄曲霉毒素检测玻璃纤维滤纸
用于去除hplc检测时部分杂峰，有效提高灵敏度。110，1.5um
100p
不锈钢均质器
高速匀浆样品，有效提高萃取效率
旋转蒸发仪-超声波发生器
酶联免疫检测法：符合标准
酶联免疫检测法采用竞争elisa，在微孔板上预包被黄曲霉毒素b1抗原，加入样本（或黄曲霉毒素m1标准品溶液）及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素m1抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素m1与预包被在板孔上的黄曲霉毒素m1抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素m1抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入tmb显色液，读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素m1抗原的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物黄曲霉毒素m1的含量。
样品处理
牛奶 直接离心取上清液用于检测
奶粉及其他固状奶制品：需要溶解于去离子水中，离心取上清液用于检测
试剂盒检测时间：30分钟＋30分钟
交叉反应率：
aflatoxin m1
100%
aflatoxin b1
8%
aflatoxin b2
10%
aflatoxin g1
7%
aflatoxin g2
5%
elisa方法检测需要：
说明
pribofast 黄曲霉毒素m1酶联免疫检测试剂盒
检测范围 (0.1 ppb －8.1ppb)
96孔
雷勃半支灭菌移液器（彩色）
多个量程：0.5-10; 20-200; 5-50; 1000-5000ul
支
雷勃八道半支灭菌移液器
量程： 5-50ul; 50-300ul
支
酶标仪
进口、国产仪器，
台
分析人员要求：
化学分析仪器及其相关专业或有液相色谱仪操作经验的人员。
注：作为面向提供霉菌毒素检测技术解决方案的主要服务商之一，pribolab凭借强大的研发团队和霉菌毒素检测技术的研究，为农业生产、食品加工与粮食、饲料工业等行业提供专业的真菌毒素检测技术产品与技术服务。北京泰乐祺作为 pribolab在中国的合作伙伴，积极为国内客户提供的霉菌毒素检测技术与产品服务，为国内客户提供适宜的霉菌毒素检测方案，帮助国内客户建立的霉菌毒素项目检测平台。