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分析苯基尿素类杀虫剂的实验方法

2025/5/18 11:56:32发布27次查看
色谱流动相的制备:
1m甲酸铵溶液:称取63g甲酸铵,溶于1l hplc级的水中。
流动相a:在1l水 (hplc级) 中加入5ml 1m 甲酸铵溶液。
流动相b:在1l甲醇 (hplc级) 中加入5ml 1m 甲酸铵溶液。
样品制备(水果与蔬菜基质)
基于anastassiadies等人提出的方法[1]:
1. 称量10g切碎的样品;
2. 加入100µl内标溶液(d5 - atrazine 1µg/ml);
3. 加入10ml乙腈,剧烈振摇;
4. 加入4g无水mgso4和1g的nacl;
5. 马上涡旋混合,以防止mgso4共聚物的生成;
6. 振摇30s后,4300r/min离心5min;
7. 取出1ml初提液,转移至含有150mg无水mgso4的离心管中;
8. 混合,5200r/min离心1min;
9. 取出500µl上清液,用水将稀释到1ml,得到提取液浓度约为0.5g/ml
基于klein和alder等人提出的方法[2, 3]:
1. 在5g或10g样品中,加入水到10ml;
2. 加20ml甲醇,使用ultraturrax 组织匀浆机匀浆2min;
3. 有时需要过滤或离心;
4. 加入nacl溶液 (100ml水中含20g nacl),每6ml加入nacl溶液2ml;
5. 用5ml样品溶液浸泡 chemelut 柱;
6. 5min后,用16ml二氯甲烷洗脱;
7. 40℃挥发至干;
8. 用甲醇与水的混合溶液1.25ml (甲醇0.25ml,水1ml) 重新溶解;
9. 用0.45µm滤膜过滤。
基于lehotay et al.[4]提出的方法:
1. 使用molinex 混合器或类似设备匀质水果或蔬菜样品;
2. 加入乙腈, (15.0 ± 0.05) g匀质的样品加乙腈15ml,超声提取2min后,混旋5min;
3. 加入6g无水mgso4和1.5g nacl的混合物,剧烈振摇1min;
4. 3000r/min离心5min;
5. 取5ml上层溶液,加入1.8g 无水mgso4和0.3g bondesil c8 吸附剂;
6. 振摇20s;
7. 使用eppendorf 5301型浓缩仪,或类似设备挥发至干;
8. 用乙腈/水=1/9的溶液1ml重新溶解样品;
9. 12000r/min 高速离心2min;
10. 上清液转入自动进样器的进样瓶中备用。
色谱分离条件
agilent 1100 系统:g1312a二元泵系统、g1367a型自动进样器、柱温箱。
色谱柱:phenomenex synergi fusion-rp反相柱,50mm×2mm,4µm,内孔 80å。
流动相:a相—水+5mm甲酸铵;b相—甲醇+5mm甲酸铵。
梯度设置:
ms/ms 检测
api 3200™或3200 qtrap® lc-ms/ms液质分析系统。turboionspray® 离子源,负离子模式,mrm扫描方式。
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