叶绿素a的测定方法有高效液相色谱法、分光光度法和荧光光谱法。高效液相色谱法精确度高,但操作步骤烦琐。目前的是分光光度法和荧光光谱法。
分光光度法是常规的分析法,仪器设备简单,灵敏度高,但是操作繁琐,分析耗时长。此方法还需要对样品进行复杂的前处理过程,很难满足水体藻类实时监测要求。
现场叶绿素a检测方法建议使用荧光法,荧光法测定叶绿素a应用广泛,该方法测定快速、操作简单,无须任何试剂。
方法原理:当丙酮提取液用436 nm的紫外线照射时,叶绿素a可发射670 nm的荧光,在一定浓度范围内,发射荧光的强度与其浓度成正比,因此,可通过测定样品丙酮提取液在436 nm紫外线照射时产生的荧光强度,定量测定叶绿素a的含量。
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