1 称取新鲜叶片2-3ｇ，剪碎放入研钵中，在液氮中研磨成粉末。
2 将粉末转移到的加有7ｍｌ经预热的1 5×ｃｔａｂ提取缓冲液15ｍｌ离心管中，迅速混匀后置于65℃水浴中，温育30ｍｉｎ。
3 取出离心管，冷却至室温，加入氯1仿/异戊1醇(24:1)，充分混匀，室温下2300×ｇ离心20ｍｉｎ。
4 将上清转移至另一新的15ｍｌ离心管中，加入1/10体积10%的ｃｔａｂ和等体积的氯1仿/异戊1醇。充分混匀，2300×ｇ离心20ｍｉｎ。
5 转移上清至另一新的15ｍｌ离心管中，加入等体积1%的ｃｔａｂ沉淀缓冲液，轻轻摇晃至形成ｄｎａ絮状沉淀。1000×ｇ离心10ｍｉｎ，使ｄｎａ沉淀于管底。
6 加入1 5-2ｍｌ的1ｍｏｌ/ｌｎａｃｌ及5μｌｒｎａｓｅ置于56℃水浴中过夜。待ｄｎａ完全溶解后，加2-3ｍｌ4℃预冷的95%的冰乙醇使ｄｎａ沉淀，挑出ｄｎａ，置于1 5ｍｌ离心管中，用70%乙醇清洗30ｍｉｎ，用离心机甩5ｓ，倒出70%乙醇，再用95%乙醇浸泡5ｍｉｎ，rna干扰载体，倒出95%乙醇，在超净工作台上吹干。
7 将风干的ｄｎａ直接在4℃保存备用或溶于100μｌｔｅ溶液中于-20℃保存。
elisa定性测定
定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测*原或antibody作出有或无的简单回答，分别用阳性、阴性表示。阳性表示该标本在该测定系统中有反应。阴性则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中，将标本作一系列稀释后进行试验，呈阳性反应的*高稀释度即为滴度。根据滴度的高低，可以判断标本反应性的强弱，这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。
在间接法和夹心法elisa中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法elisa中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。
从动物组织中提取*组dna
使用研钵进行匀浆时：
① 取1～100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的研钵中，快速用力展研成匀浆。注）下列组织请加液氮研磨至粉末状。
a．富含dna酶的胰脏、脾1脏、胸腺、淋巴等组织。
b．富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等组织。
c．富含角质蛋白的组织或坚硬的组织（如骨骼）等。
② 加入650 μl的solution a和0.9 μl的rnase a1，温和研磨30秒钟。注）使用上述①-注）的实验材料时，请在加入solution a及rnase a1后，将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。
③ 收集650 μl研磨好的组织匀浆液移至collection tube中。如果匀浆体积不足650 μl，请补充solution a至650 μl，65℃保温5分钟。
使用研磨棒进行匀浆时:
① 取1～100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的collection tube 中，用研磨棒快速研磨成糊状。
② 加入350 μl的solution a和0.9 μl的rnase a1后用研磨棒快速研磨成匀浆。
③ 加入350 μl的solution a将研磨棒上的匀浆冲入collection tube中，充分振荡混合后，65℃保温5分钟。
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