为建立快速、简单、灵敏、有效的玉米赤霉烯酮的检测方法,将玉米赤霉烯酮与羧甲氧基胺半盐酸盐反应,合成半抗原,通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备玉米赤霉烯酮人工抗原,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌抗玉米赤霉烯酮抗体的单克隆细胞株。该单克隆抗体的抗体类型及亚类均为,其轻链为kappa链。制备的单克隆抗体腹水通过间接酶联免疫吸附测定。该单克隆抗体对玉米赤霉烯酮,除与玉米赤霉烯酮结构类似物有一定的交叉反应外,与其他参试真菌毒素均无交叉反应。所制备的单克隆抗体可用于玉米赤霉烯酮毒素初筛和定性检测。
鼠抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的创新点:
采用鼠抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体,基于竞争反应模式,通过对金颗粒尺寸、免疫层析相关组成材料及缓冲液配方的系列优化,同时借助手持式信号读取装备,实现对谷物和饲料中赭曲霉毒素a和玉米赤霉烯酮的同时定量检测。该方法简单、快速且成本低,与液相色谱串联质谱(lc-ms/ms)一致性良好,便于基层单位的推广使用。
