加样时应将所加物加在elisa 板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出。
2保温
在建立elisa 方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2 小时，产物的生成可达。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，反应板不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成，采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应，边上的值会偏高，建议为了客观的判断结果，将质控放在非边缘位置。
3洗涤
洗涤在elisa 过程中虽不是一个反应步骤，但却决定着实验的成败。elsia 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在elisa 操作中，洗涤是zui主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。
洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释，应按要求稀释，所用的水电导率在1.5us/cm 之下，洗液如果结晶应待其融解后配制。保证洗板浸泡时间为40 秒左右，孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好，进口原装elisa试剂盒手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。
人β2糖蛋白(β2-gp)elisa试剂盒 进口/原装 英文名称： human beta2 glycoprotein，β2-gp elisa kit 规格: 96t/48t
人α乳清蛋白(α-la)elisa试剂盒 * 英文名称： human α lactalbumin，α-la elisa kit 规格: 96t/48t
人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(lf/ltf)elisa试剂盒 * 英文名称： human lactoferrin，ltf/lf elisa kit 规格: 96t/48t
人髓磷脂碱性蛋白(mbp)elisa试剂盒 进口/分装 英文名称： human myelin basic protein，mbp elisa kit 规格: 96t/48t
人高迁移率族蛋白b1(hmgb-1)elisa试剂盒 进口/原装 英文名称： human high mobility group protein b1，hmgb-1 elisa kit 规格: 96t/48t
人结蛋白(des)elisa试剂盒 * 英文名称： human desmin，des elisa kit 规格: 96t/48t
人s100蛋白(s-100)elisa试剂盒 * 英文名称： human soluble protein-100，s-100 elisa kit 规格: 96t/48t
人s100b蛋白(s-100b)elisa试剂盒 进口/分装 英文名称： human soluble protein-100b，s-100b elisa kit 规格: 96t/48t
人β内啡肽(β-ep)elisa试剂盒 进口/原装 英文名称： human beta-endorphin，β-ep elisa kit 规格: 96t/48t进口原装elisa试剂盒