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红细胞膜蛋白7.2b(STOM)ELISA试剂盒​操作步骤

2024/4/21 21:21:34发布12次查看
红细胞膜蛋白7.2b(stom)elisa试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟。
小鼠髓过氧化物酶(mouse mpo)
小鼠粘蛋白(mouse muc5ac)
小鼠肌肉生成抑制素(mouse myostatin)
小鼠巨噬细胞游走抑制因子(mouse mif)
小鼠巨嗜细胞炎性蛋白-1(mouse mip-1)
小鼠巨嗜细胞炎性蛋白-2(mouse mip-2)
小鼠巨嗜细胞炎性蛋白-3a(mouse mip-3a)
小鼠巨嗜细胞炎性蛋白-3β(mouse mip-3β)
小鼠巨嗜细胞炎性蛋白-1a(mouse mip-1a/ccl3)
小鼠基质金属蛋白酶-1(mouse mmp-1)
小鼠基质金属蛋白酶-2(mouse mmp-2)
小鼠基质金属蛋白酶-3(mouse mmp-3)
小鼠基质金属蛋白酶-9(mouse mmp-9)
小鼠核转录因子(mouse nf-kb )
小鼠核转录因子p65(mouse nf-kbp65)
小鼠硝基酪氨酸(mouse nitrotyrosine)
小鼠神经肽y(mouse npy)
小鼠神经生长因子(mouse ngf)
小鼠神经营养素3(mouse nt-3)
小鼠神经营养素4(mouse nt-4)
小鼠一氧化氮(mouse no)
小鼠骨保护素(mouse opg)
小鼠骨桥素(mouse opn)
小鼠骨钙素(mouse osteocalcin)
小鼠8-羟基脱氧8-ohdg鸟苷酸(mouse 8-ohdg)
小鼠食欲素a(mouse orexin a)
小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse oxldl)
小鼠抑瘤素mouse oncostatin m(mouse osm)
小鼠催产素(mouse oxytocin)
小鼠骨保护素配体(mouse opgl)
小鼠血小板活化因子(mouse paf)
小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(mouse pap)
小鼠血小板相关抗体igg(mouse paigg)
小鼠增殖细胞核抗原(mouse pcna)
小鼠纤溶酶原激活剂抑制物-1(mouse pai-1)
小鼠血小板生长因子(mouse pdgf)
小鼠血小板源生长因子-bb(mouse pdgf-bb)
小鼠血小板生长因子受体α(mouse pdgf srα)
小鼠可溶程序性死亡因子(mouse spd-1)
小鼠6-酮-前列腺素f1a(mouse 6-k-pgf1a)
小鼠前列腺素e2(mouse pge2)
小鼠磷脂酶a2(mouse spla2)
小鼠pleiotrophin(mouse pleiotrophin)
小鼠p53蛋白(mouse p53)
小鼠趋化因子(mouse rantes)
小鼠抵抗素(mouse resistin)
小鼠可溶性破骨细胞异化因子(mouse srankl)
小鼠血清淀粉样蛋白(mouse saa)
小鼠s-100蛋白(mouse s-100)
小鼠性激素结合球蛋白(mouse shbg)
小鼠超氧化物歧化酶(mouse sod)
小鼠生长抑素(mouse somatostatin)
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