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原代细胞传代次数

2024/4/19 20:24:05发布8次查看
原代细胞传代次数—传代次数是指对一个细胞系进行分批传代的频度(通常在一个实验室范围内)。某些细胞系相比较其他细胞系而言较不稳定,可能会随着培养时间的延长而改变,视不同的细胞系和培养条件而定。因此名称相同的同一细胞系在生理学和形态学(以及转染能力)性质也可能会有很大的差异。一般而言,细胞在冻存复苏后的一两代之内或直到它们*复苏之前都很难转染。细胞数量(融合率)——只要培养基质(组织培养皿)尚有空间,细胞就会按指数规律分裂。对于正常细胞而言,细胞生长的速度受细胞密度大小的抑制(接触抑制),但癌细胞则不受此限制而会继续生长并可互相叠加。营养物质的耗竭以及代谢废物的积聚会影响所有的细胞生长。细胞会因受到营养物质匮乏的压力而不适于转染。报告基因的表达率与转染开始时的细胞数量和细胞健康以及细胞溶解之前的生长情况相关。
培养物污染——培养物可被细菌、酵母、真菌、病毒、支原体、甚至其他细胞种类所污染。各种污染都会导致产生错误的结果。支原体污染——支原体污染在所有培养细胞中的比例为5-35%,它可改变细胞生长特性,酶的作用途径,细胞膜的组成,染色体结构,以及转染效率。特别是,原代细胞支原体对采用脂质、deae-右旋糖酐、磷酸钙或腺病毒介导的转染技术有所干扰,其结果致使非典型转染或转染效率偏低。这些影响会导致实验结果的不可靠以及时间和珍贵细胞系的损失。和细菌及真菌不同,支原体污染无法通过视觉检查发现。它们非常小甚至能够通过大多数的无菌滤膜;它们还对常用抗生素有抗药性。所以必需进行支原体污染的常规筛查。
白介素2igg 小鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm actinin-α)
白介素2受体γ链igg 小鼠黑色素(mc ab)
白介素31受体aigg 小鼠核因子κb亚基p65亲和肽(nf-κb p65)
白介素32igg 小鼠核因子κb受体活化因子配基(rankl)
白介素33igg 小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( ppar-γ)
白介素33igg 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(ppar-α)
白介素3igg 小鼠过敏毒素/补体片断4a(c4a)
白介素3受体a链igg 小鼠骨粘连蛋白(on)
白介素4igg 小鼠骨形成蛋白6(bmp-6)
白介素5igg 小鼠骨形成蛋白(bmps)
原代细胞
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