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可溶性果胶含量检测试剂盒商品货号：ms2635
英文名称：soluble pectin assay kit
别名：可溶性果胶含量测试盒
检测方法：微量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
ms2635-100管/48样 索桥生物 100管/48样 ￥950.00元
产品详细介绍测定意义：
果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分，主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，是许多高等植物细胞壁中含量丰富的多糖成分，其*的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。果胶间以ca2+桥及其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联，通过不同的抽提方法可以提取各种形式的果胶，如水溶性果胶（wsp）、离子结合型果胶isp和共价结合果胶（csp）。
测定原理：
利用酸溶液提取得到wsp可溶性果胶，采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应，生成物质在530 nm处有大吸收峰。
产品说明书
货号: ms2635 规格：100 管/48 样
可溶性果胶(wsp)含量试剂盒说明书 可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分，主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。 果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，是许多高等植物细胞壁中含量丰 富的多糖成分，其*的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。果胶间以 ca2+桥及 其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联，通过不同的抽提方法可以提取各种 形式的果胶，如水溶性果胶（wsp）、离子结合型果胶（isp）和共价结合果胶（csp）。
测定原理：
利用酸溶液提取得到（wsp）可溶性果胶，采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半 乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应，生成物质在 530 nm 处有大吸收峰。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英玻璃比色皿/96 孔板、80％ 乙醇、丙酮、浓硫酸（不允许快递）、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体 100ml× 1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 100ml× 1 瓶，4℃保存。
试剂三：标准液 1ml× 1 支，4℃保存。
试剂四：液体 5 ml× 1 瓶，4℃保存；
样品的前处理：
1、 细胞壁的提取：取约 0.3g 样本，加入 1ml 80％乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴 20min， 冷却至室温，4000g 25℃离心 10min，弃上清。沉淀加入 1.5ml80％乙醇和丙酮各洗一遍（涡 旋振荡 2min 左右，4000g 25℃离心 10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入 1ml 试剂一（去除淀粉）浸泡 15 小时，4000g 25℃离心 10min，弃上清，将沉淀干燥，称重得 细胞壁物质（cwm）。
2、 wsp 的提取：称取烘干的 cwm 3mg，加入 1ml 试剂二，充分匀浆。8000g 4℃离心 10min， 取上清液待测。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 530nm 处，蒸馏水调零；试剂三和试剂 四 37℃预热 10min 以上；
2、操作表：
试剂名称（µl） 空白管 标准管 对照管 测定管
待测样本 50 50
试剂三 50
蒸馏水 50 50
试剂四 50 50 50
浓硫酸 400 400 400 400
混匀，95℃水浴 5min 后，冷却至室温，取 200µl 至微量石英比色皿或 96 孔板中，530nm 处读 取吸光值，空白管、标准管、对照管和测定管吸光值分别记为 a1、a2、a3 和 a4。若 a 大于 2， 需将待测样本用蒸馏水稀释（可稀释 10 倍或 20 倍）。空白管和标准管只要做一管，每个测定 管需设一个对照管。
wsp 含量计算：
wsp 含量(mg /g 干重)= (c 标准×v1) ×(a4-a3)÷(a2-a1)÷(w×v1÷v2) ×稀释倍数 =0.05×(a4-a3)÷(a2-a1)÷w×稀释倍数
c 标准：标准管浓度，0.05mg/ml；v1：加入样本体积，0.05ml；v2：加入提取液体积，1ml；
w：样本干重，g。
注意：低检测限为 50μ g /g 干重
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