非蛋白巯基检测试剂盒商品货号：ms1520
英文名称：non-protein sulfhydryl group assay kit
别名：非蛋白质巯基试剂盒 非蛋白质巯基测试盒
检测方法：微量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
ms1520-100管/48样 索桥生物 100管/48样 ￥200.00元
产品详细介绍
测定意义：
生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能，对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。
测定原理：
巯基基团与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（dtnb）反应，生成黄色化合物，在412nm处有大吸收峰。
产品说明书货号：ms1520 规格：100 管/48 样
非蛋白巯基测定试剂盒说明书 微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功 能，对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。
测定原理：
巯基基团与 5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（dtnb）反应，生成黄色化合物，在 412nm 处 有大吸收峰。 自备实验用品及仪器： 天平、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和甲醇。
试剂组成和配制：
提取液：液体 100 ml×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 15 ml×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 1 ml×1 管，4℃避光保存。
样品的制备：
1. 动物、植物组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 提取液）进行冰浴匀浆，然后加入 4ml 甲醇，室温震荡 10min，然后 10000g， 4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细 胞加入 1ml 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min） 然后 10000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
3. 血清、培养液：取 0.1ml，加 0.4ml 甲醇，室温震荡 10min，然后 10000g，4℃离心 10min， 取上清置冰上待测。
操作步骤：
1、分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 412nm，蒸馏水调零。
2、操作表
对照管 测定管
样品（μ l） 40 40
试剂一（μ l） 150 150
试剂二（μ l） 10
h2o（μ l） 10
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 1.7236 x，r 2 = 0.9994
1. 组织：
非蛋白质巯基含量（μ mol/g 鲜重）= 1.7236 /a ×v 反总÷ (v 样÷v 样总×w) ×5=14.5×δ a÷ w
2. 血清、培养液：
非蛋白质巯基巯基含量（μ mol/ml）= 1.7236 /a ×v 反总÷v 样×5=14.5×δ a
3. 细胞：
非蛋白质巯基含量（μ mol/10^4）= 1.7236 /a ×v 反总÷ (v 样÷v 样总×细胞数量) ×5 =14.5×δ a÷细胞数量
v 反总：反应总体积，0.2ml；v 样：反应中样品体积，0.04ml；v 样总：加入提取液体积，1ml； w：样品质量，g ；cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；
注意事项： 低检出限为 10μ mol/l。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.8618x，r 2 = 0.9994
1. 组织：
非蛋白质巯基含量（μ mol/g 鲜重）= 0.8618 /a ×v 反总÷（v 样÷v 样总×w）×5= 29×δ a÷w
2. 血清、培养液：
非蛋白质基含量（μ mol/l）= 0.8618/a ×v 反总÷v 样×5=29×δ a
3. 细胞：
非蛋白质巯基含量（μ mol/10^4）= 0.8618 /a ×v 反总÷ (v 样÷v 样总×细胞数量) ×5 =29×δ a÷细胞数量
v 反总：反应总体积，0.2ml；v 样：反应中样品体积，0.04ml；v 样总：加入提取液体积，1ml； w：样品质量，g ；cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；
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