1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过一夜；
2.次日洗涤3次；
3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；
4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；
6.’zui后一遍用ddw洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法的4、5、6。
双抗体夹心法
1.包被：用0.05mph9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过一夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+、“-号表示。也可测od值：在ｔｓｚelisa试剂盒检测仪上，于450nm（若以abts显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔od值，若大于规定的阴性对照od值的2.1倍，即为阳性。
进口/国产 人糖原合成酶激酶(gsk)elisa kit，48t/96t
进口/原装 小鼠糖原合成酶激酶(gsk)elisa kit，48t/96t
进口/分装 大鼠糖原合成酶激酶(gsk)elisa kit，48t/96t
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进口/国产 人胃蛋白酶(pepsin)elisa kit，48t/96t
进口/原装 小鼠胃蛋白酶(pepsin)elisa kit，48t/96t
进口/分装 大鼠胃蛋白酶(pepsin)elisa kit，48t/96t
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进口/国产 小鼠血小板衍生生长因子bb(pdgf-bb)elisa kit，48t/96t
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进口/分装 人胰蛋白酶原激活肽(tap)elisa kit，48t/96t
* 小鼠胰蛋白酶原激活肽(tap)elisa kit，48t/96t
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进口/原装 人补体因子h(cfh)elisa kit，48t/96t
进口/分装 小鼠补体因子h(cfh)elisa kit，48t/96t
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进口/国产 人角化细胞生长因子(kgf)elisa kit，48t/96t
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ｔｓｚelisa试剂盒