电转是一个常规但不简单的细胞转染实验。转染试剂、转染条件、底物质量等对电转效率的影响至关重要,lonza nucleofector技术为您提供电转整套解决方案。
除了以上几点,还需要保持良好的细胞状态。细胞状态不好,往往会导致转染效率低下,为确保良好的细胞状态,需注意以下几点:
细胞应处于对数生长期,此时细胞膜的恢复能力更强,从而提高电转后的细胞存活率。
细胞的传代次数应较低,转染实验前,细胞解冻后传代3~4次。
必须进行支原体污染的常规检查。支原体生长缓慢,非常隐蔽,很难监测和预防,细胞被支原体污染后,不会马上死亡,但几乎可以改变细胞的所有功能,包括细胞新陈代谢、酶的作用途径,染色体畸变、细胞膜的组成等。在细胞培养过程中,支原体污染也会极大地影响细胞转染的效率。
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lonza mycoalert™支原体检测试剂盒主要有两大优势:
1)操作简单;
2)检测时间短。
其通过检测在支原体和其柔膜细菌中存在的乙酸激酶和氨基甲酸激酶的活性,完成支原体检测。仅需两步简单操作,20分钟即可完成检测。
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