agilent液相色谱仪标准操作程序
1.目的：建立一个高效液相色谱的标准操作程序。
2.范围：适用于agilent高效液相的使用。
3.责任：使用agilent高效液相的化验员。
4.程序
4.1工作环境
实验室温度为20～27℃，温度变化<3℃/hr，相对湿度<80%，液相色谱仪工作台，长2米、宽0.8米、承重大于80公斤，离墙距离0.3米以上。单相交流220v，（+5%～10%），50～60hz，有单独的良好接地。配置稳压电源，功率大于2.5千瓦。
4.2使用前的准备
4.2.1二次蒸馏水，（建议用0.45微米水相滤膜过滤）；甲醇或乙晴（色谱纯），（建议用0.45微米有机相滤膜过滤）；其他样品所需流动相，（都需经过0.45微米滤膜过滤）。将上述溶剂放入超声波池，除去气泡，方可使用。
4.2.2把流动相放入溶剂瓶中，打开purge阀，单击pump图标，出现参数设定菜单，单击setup选项，进入pump编辑画面，设flow：5ml/min，单击ok；单击pump图标，出现参数设定菜单，单击pump control选项，选中on，单击ok，则系统开始purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续purge，直到所有要用通道无气泡为止；单击pump图标，出现参数设定菜单，单击setup选项，进入pump编辑画面，设flow：1.0ml/min，关闭purge valve。单击pump下的的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，也可输入阻止分析和关泵的体积，单击ok。
4.2.3进行样品前处理（稀释或溶解至所需浓度）。
4.3agilent液相色谱仪实验步骤
4.3.1准备
4.3.1.1开启agilent 1100lc各模块电源。
4.3.1.2打开计算机，双击online图标。
4.3.1.3从view菜单中选择method and run control画面，单击view菜单中的show top toolbar,show status toolbar,system diagram,sampling diagram使其命令前有√标志。
4.3.2数据采集方法编辑
4.3.2.1从“method菜单中选择edit entire method项，选中除data analysis外的三项，单击ok，进入下一画面。
4.3.2.2在method comments中加入方法的信息（如this is for test!），单击ok进入下一画面。
agilent液相色谱仪
4.3.2.3泵参数设定
在flow处输入流量1ml/min，在solvent处输入流动相中各溶剂所占的比例，也可insert一行timetable,编辑梯度。在pressure limits max处输入柱子的zui大耐高压，以保护柱子，单击ok进入下一画面。
4.3.2.4柱温箱参数设定
在temperature下面的方框内输入所需的温度，并选中它点击more>>键，如图所示，选中same as left使柱温箱的温度左右一致，点击ok进入下一画面。
4.3.2.5 vwd检测器参数设定
在wavelength下方的空白处输入所需的检测波长，在peak width(response time)下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如>0.1min 。 在timetable中可以insert一行，可以输入随时间切换的波长。
agilent液相色谱仪
4.3.2.6在run time checklist中，选中data acquisition，单击ok。
4.3.2.7单击“method菜单，选中save method as，输入一方法名，单击ok。
4.3.2.8从run control菜单中选择sample info选项，输入操作者姓名，在data file中选择manual或prefix。
4.3.2.9从instrument菜单中，选择system on。
4.3.2.10单击ok，等仪器ready，基线平稳，从method菜单中选择run method，进样。
4.3.2.11进样时，阀门位置处于inject位置，进样针取样量应为所规定体积的三倍，用滤纸拭净针头表面残留液，进样时要轻而快，进样完毕应快速将阀门搬至load位置，进样完毕，数分钟后将进样针拔下，阀门回复到inject位置。 4.3.3数据分析方法编辑
4.3.3.1从view菜单中，单击data analysis进入数据分析画面。
4.3.3.2从file菜单中选择load signal选项，选中您的数据文件，单击ok。
4.3.3.3做谱图优化，从graphics菜单中选择signal options选项，从ranges中选择auto scale及合适的显示时间，单击ok，或选择use ranges调整。反复进行，直到图的比例合适为止。
4.3.3.4积分
4.3.3.4.1从integration中选择auto integrate，如积分结果不理想，再从菜单中选择integration events选项，选择合适的slope sensitivity,peak width,area reject,height reject。
4.3.3.4.2从integration菜单中选择integrate选项，则数据被积分。
4.3.3.4.3如积分结果不理想，则重复上两步动作，直到满意为止。
4.3.3.4.4单击左边√图标，将积分参数存入方法。
4.3.3.5打印报告
4.3.3.5.1从report菜单中选择specify report选项，进入。
4.3.3.5.2单击quantitative results框中calculate右侧的黑三角，选择所需的报告形式，其他选项不变，单击ok。
4.3.3.5.3从report菜单中选择print report，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则单击report底部的print钮。
4.3.4agilent液相色谱仪关机
4.3.4.1关机前，先用水和有机溶剂对系统进行梯度冲洗，然后再用有机溶剂冲洗系统，然后关泵（适用于反相色谱柱）。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]
4.3.4.2退出化学工作站，及其他窗口。
4.3.4.3关掉agilent1100电源开关，计算机（用shut down关）。
4.4.1色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死。
4.4.2对于手动进样器，当使用缓冲液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次。
4.4.3流动相使用前必须过滤、超声，不能使用多日存放的纯化水（易长菌），应每天更换纯化水。
agilent液相色谱仪
上海莱睿科学仪器有限公司