一、pcr仪器之间的差别对实验结果的影响。如前所述,没有任何两台pcr仪器的温度控制是一模一样的。相对于预设的温度模块温度总是偏高或偏低,就是同一模块不同的孔之间,温度有时也会不一样,相差可能达几摄氏度之多。一些pcr仪温度控制性能的不足造成的后果是:当pcr仪的模块温度在升温时,温度过冲或不足,不能准确的达到预设的平台温度。
二、温度控制技术的差别对实验结果的影响。导致pcr仪温度控制性能优劣的因素,首先是温度控制技术。调节pcr仪模块的温度,使其达到并保持在某一温度有很多方式。每一种方式都有优点和缺点。另外,这些技术被运用控制的水平对于温度控制的水准是很重要的,且有很大不同。大多数pcr仪器的温度控制性能是很差的。在单一或多传感器控制机制上的不同显而易见的引起了温度的不均一性。
pcr仪是一种高精度的仪器,一旦出现一些温度或者检测上的小偏差,很可能对实验结果产生较大的影响,所以我们在日常使用pcr仪的时候,要注意对其的保养,下面就跟随君意生物一起来看看吧:
1、仪器安置
仪器应安放在湿度较低、灰尘较少并远离水源和热源的地方,无腐蚀性气体或强磁场干扰。
环境温度建议在18~35℃之间。仪器之间应保持50cm 以上距离,降低仪器之间的影响。
2. 使用前预热
老款的pcr仪的性能比不上新款仪器,使用前需要进行预热,不仅对仪器维护有好处,还能节约实验时间。新款的仪器升温快,但还是建议能在进行实验前预热2min,这样可以有效延长仪器的使用寿命。
pcr就是利用dna聚合酶对特定基因做体外或试管内in vitro的大量合成,基本上它是利用dna聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据dna扩增的目的和检测的标准,可以将pcr仪分为普通pcr仪,梯度pcr仪,原位pcr仪,实时荧光定量pcr仪四类。
pcr的要素基本的pcr须具备1.要被复制的dna模板 template2.界定复制范围两端的引物primers.3.dna聚合酶taq. polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。
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