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镉离子的核酸适配

2026/4/3 6:18:10发布19次查看
实验部分
tc-xp-g pcr 仪( 杭州博日科技有限公司) ; vortex-5 旋涡混合仪( 海门市其林贝尔仪器制造有限公司) ; fa2204b 电子天平( 杭平公司) ; s210 ph 计( 梅特勒-托利多仪器有限公司) ; chi660e 电化学工作站( 上海辰华仪器有限公司) ; tgl-16g 高速离心机( 上海安亭科学仪器厂) ; savant aa 石墨炉原子吸收分光光度计( 澳大利亚 gbc 科学仪器公司) 。三羟甲基氨基甲烷( tris) 、巯基己醇( mch) 、三-( 2-甲酰乙基) 膦盐酸盐( tcep) ( sigma-aldrich 公司) ; k3[fe( cn) 6]、kcl、nacl、cdcl2、hgcl2、zncl2、cucl2、fecl2、pb( ac) 2、h2o2( 30%) 、浓 h2 so4、无水乙醇、nah2po4、k2hpo4 ( 国药集团化学试剂公司) 。所用试剂均为分析纯; 实验用水为超纯水( ≥18.3 mω·cm) 。
结果与讨论
采用竞争法实现响应信号“turn off”变化,发展了一种检测 cd2+的电化学生物传感器。5'端修饰巯基的 cdna 通过 aus键固定在金电极上,随后将适配体 cd apt 滴加到电极表面,与 cdna 通过碱基互补配对,形成部分互补的双链 dna,刚性的双链结构可极大地增加电极表面直立状态 dna 的数量。由于 cd apt 的 3'端修饰有 fc,fc 靠近电极,引起高强度的信号; 当 cd2+存在时,cd apt 与 cd2+发生特异性结合,破坏 dna的双链结构,使 cd apt 游离出来,修饰电极 fc 的电流信号随之减弱,使用 swv 法通过检测信号的变化实现对 cd2+的快速、灵敏检测。相比于电极表面直接修饰适配体序列,利用竞争法,靶分子与适配体结合,与互补序列分离,有利于增强电极表面电阻抗的变化程度,提高了灵敏度。
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