测定试剂盒说明书
for research use only
仅供研究用
货号：qys-235098
分光光度法 50 管/48 样
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定
测定意义
土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 ph 显著影响，根据zui适 ph 范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
测定原理
酸性环境中 s-acp 催化磷酸苯二钠水解生成*和*，通过测定酚的生成 即
算出 s-acp 活性。
自备仪器和用品
见分光光度光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。
试剂组成和配制
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粗酶液提取：
称取风化混匀土壤约 0.1g，加入 50µl 甲苯（自备），轻摇 15min；加 0.4ml 试剂一并且摇匀后，置于 37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应 24h；到时后迅速加入 1ml 试剂二充分混匀， 以终止酶催化的反应。8000g，25℃离心 10min，取上清液置于冰上待测。
测定步骤
1.分光光度计预热 30 min，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。
2.空白管：取1ml 玻璃比色皿，加入 50 µl 蒸馏水，100 µl 试剂三，20 µl 试剂四，充分混匀， 显色后再加蒸馏水 830 µl，混匀后 25℃静置 30 min，于 660 nm 测定吸光度，记为 a空白管。
3.标准管：取1ml 玻璃比色皿，加入 50 µl 标准液，100 µl 试剂三，20 µl 试剂四，充分混匀， 显色后再加蒸馏水 830 µl，混匀后 25℃静置 30 min，于 660 nm 测定吸光度，记为 a标准管
4.测定管：取1ml 玻璃比色皿，加入 50 µl上清液，100 µl 试剂三，20 µl 试剂四，充分混匀， 显色后再加蒸馏水 830 µl，混匀后 25℃静置 30 min，于660 nm 测定吸光度，记为 a测定管。
注意 空白管和标准管只需测定一次
s-acp 活性计算公式
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