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人源细胞传代方法

2026/2/9 6:24:40发布14次查看
1.从培养容器中吸出用过的人源细胞并丢弃;
2.用不含钙、镁的*冲洗细胞(每10cm2培养表面积约2ml溶液);从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液,以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次(注:冲洗步骤可去除可能抑制解离剂作用的少量血清、钙和镁);
3.从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的解离剂;试剂量应足以覆盖细胞层(每10cm2大约0.5ml);
4.轻轻摇晃容器,使试剂*覆盖细胞层;吸出多余解离试剂,t25细胞培养瓶留200ul左右即可;
5.将培养容器在室温下孵育约2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异);
6.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达90%,可将孵育时间延长几分钟,每30秒钟检查一次解离情况;也可轻轻拍打培养容器以加快细胞解离;
7.细胞解离程度大于等于90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍体积的预热*生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散;
8.将细胞转移到15ml无菌离心管中,以200×g的离心力离心3-5分钟(请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异);
9.用zui少体积的预热*生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将人源细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖)。
20mg/支 42553-65-1 crocin 西红花苷
20mg/支 94238-00-3 crocin i 西红花苷i
20mg/支 55750-84-0 crocin ii 西红花苷ii
20mg/支 480-16-0;654055-01-3 morin hydrate 桑色素
20mg/支 77-95-2 d-(−)-quinic acid d-(-)-奎宁酸
20mg/支 2415-24-9 catalpol 梓醇
20mg/支 60-81-1 phlorizin 根皮苷
20mg/支 5289-74-7 ecdysterone 蜕皮激素
20mg/支 23513-14-6 6-gingerol 6-姜酚
20mg/支 4431-01-0; 81944-09-4 ligustilide 蒿本内酯
5mg/支 19130-96-2 1-deoxynojirimycin 脱氧野尻霉素
20mg/支 546-43-0 alantolactone 土木香内酯
人源细胞
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