1.将特异性抗体与固相载体联结，构成固相抗体。洗刷除掉未结合的抗体及杂质。
2.加受检标本，保温反响。标本中的抗原与固相抗体结合，构成固相抗原抗体复合物。洗刷除掉其他未结合物质。
3.加海标抗体，保温反响。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗刷未结合的酶标抗体。此刻固相载体上带有的酶量与纭本中受检抗原的量相关。
4.加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色物。经过比色，测知标本由抗原的量。
在临床查验中，此法适用于检测各种蛋白质等大分子抗原，例如hbsag、hbaag、afp、hcg等。只需取得针对受检抗原的特异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而树立此法。如抗体的来历为抗血清，包被和海标用
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