1、熟悉干细胞周期的基本概念、原理，掌握实验操作的流程和方法。
2、观察流式细胞仪检测、分析细胞周期的各种峰形图的意义。
3、了解细胞周期测定实验的用途。
二、原理
细胞周期是指从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束所经历的时间。细胞周期反映了细胞的增殖速度，周期越短说明细胞的增殖速度越快。测定细胞周期的方法很多，有同位素标记法、细胞计数法和流式细胞仪测定法等。流式细胞仪测定法是利用溴化乙锭（pi）渗入测定细胞周期的方法。溴化乙锭加入培养基后，可做为细胞dna复制的原料，经过两个细胞周期后，细胞中两条单链均含溴化乙锭的dna将占l/2，反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期，则染色体中约一半为两条单体均浅染，另一半为一深一浅。细胞如果仅经历了一个周期，则两条单体均深染。计分裂相中各期比例，就可算出细胞周期的值。
三、材料
1、秋水仙素。
2、溴化乙锭（1.0mg/ml）。
3、无水乙醇。
4、rpmi1640*培养基。
5、rnase a (1mg/ml)。
6、pbs。
7、6孔细胞培养板。
8、离心机。
9、流式细胞仪。
10、细胞培养箱。
四、方法
1、取1×106对数生长期的细胞接种于6孔板，调整好细胞生长状态。
2、离心收集细胞，弃上清，用预冷pbs洗涤两次。
3、加入预冷70％乙醇0.5ml，于4℃固定30分钟。
4、离心收集细胞，取1ml pbs洗涤一次，加入0.2ml反应液(含50靏/ml溴化乙锭，100靏/ml rnase a和0.2% triton x-100 的pbs)，4℃避光孵育30分钟。
5、pbs洗涤两次，用流式细胞仪检测分析。
五、干细胞注意事项
1、实验操作过程中动作要尽量轻柔，不可用力打碎细胞。
2、rna酶现加，以*去除细胞中rna的干扰。
3、溴化乙锭是光敏物质，操作过程中注意避光。
4、zui后一步的洗涤应尽量弃净上清，以免游离pi残留影响实验结果。
17429-69-5 astragaloside 20mg/支 黄芪总皂苷
84687-43-4 astragaloside iv 20mg/支 黄芪甲苷
84680-75-1 astragaloside i 10mg/支 黄芪皂苷i
84676-89-1 astragaloside ii 10mg/支 黄芪皂苷ii
84687-42-3 astragaloside iii 10mg/支 黄芪皂苷iii
97-53-0 eugenol 0.5ml/支 *
860-79-7 cyclovirobuxine 20mg/支 黄杨碱
10338-51-9 salidroside 20mg/支 红景天苷
干细胞
84954-93-8 rosarin 20mg/支 络塞琳
84954-92-7 rosavin 20mg/支 络塞维
85026-55-7 rosin 20mg/支 络缌
100462-37-1 rosiridin 20mg/支 络塞定