1.血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻2.在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。
3.吸取液体时速度不易太快，以免产生气泡，吸取的量不够准确。
4.样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶，如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。1．5 吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸，减少误差。
5.液体全部加入酶标孔后，将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s，使液体充分混合均匀，也使其得到充分的反应。
6.孵育时要使盖板膜封好酶标板，防止水分蒸发，以防曲线不成线性。
7.实验前30min将试剂盒中的所有试剂从冰箱取出，使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同，酶标板只要取出所需量。
8.由于底物显色剂对光及其敏感，因此要避光保存。
要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以hrp为标记酶的elisa测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的hrp底物反应显色
9.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑l中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
10.检测吸光度前应将酶标仪打开，将其预热30min以上。
11.底物为tmb，避免与皮肤相接触。终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性，应尽量避免接触皮肤。
12.孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。