1、首先在使用紫外分光光度计前，用户应先了解仪器的结构和工作原理，以及各个操作旋钮的功能。在未接通电源前，应对仪器进行检查，电源线接线应牢固，通地要良好，各个调节旋钮的起始位置要正确，然后接通电源开关。
2、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“t” ，波长调至测试用波长。仪器预热30 分钟。
3、打开试样室盖，调节“0”旋钮，使数字显示为“0。00”盖上试样室盖，将比色皿架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100％”旋钮，使字显示为“100。0”
4、预热后，按（3）连续几次调整“0”和“100％”，紫外分光光度计即可进行测定工作。
5、吸光度的测量：按（3）调整仪器的“00.0”和“100％”后，将选择开关置于“a”，调节吸光度调零旋钮，使数字显示为“000” ，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。