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液相色谱法—检测黄曲霉毒素残留
1.原理
样品经有机溶剂提取、净化和衍生化反应后，浓缩液注人hplc仪，经色谱柱分离，分离出的组分依次进人荧光检测器（发射波长360 nm、激发波长245 nm），产生相应的电信号，由记录仪记录响应信号，经微处理机自动计算及打印出样品中aft含量（ng）。
2.仪器
hpi.c仪（具荧光检测器）。
3.试剂
①硅镁型吸附剂：100-1200目，350℃烘2 h，冷后装入密闭容器中，用前加水15％减活，平衡48h。可谇续傅用7天。
②流动相：甲醇+0.01mol·l-1 kh2p04（1+1）溶液配制后，经0.45 um滤膜抽滤并脱气。
③层析柱，底层和上层为2.cin厚的无水na2s04，中层为0.4 g硅镁吸附剂，均以氯仿湿润。
④其他试剂参照薄层层析法。
4.仪器工作条件
①具荧光检测器（激发波长245 nm、发射波长360 nm）。
gain置16，span置max。
柱：c18 10um（radial pak cartridges）。
流动相：甲醇+0.01tool／l kh2p04（1+1）。
流速：1.3 ml／min。
②进样量：10 ul。
5.检测步骤
①样品提取与净化：准确称取样品10 g于具塞锥形瓶中，加50 mi。氯仿，振荡30 min，过滤于层析柱中，用氯仿+正己烷（1+1）8 mi，，氯仿+甲醇（9+1）10 ml，淋洗除杂质，zui后用20 ml丙酮+水（99+1）洗脱黄曲霉毒素，收集于烧杯中，在50℃水浴中挥干溶剂，再用氯仿分次将残渣洗人2 ml具塞试管中，并于50℃水浴中通nz吹干。
②衍生化反应：向具塞试管中加200ui。正己烷，50ul三fu乙shuan，将盖盖紧，充分混匀1 min，静置30 rain后用nz吹干。加100ul流动相，充分混匀，待检。
③标准液的处理：取适量标准溶液，按样品处理方法萃取、净化和衍生化反应，定容，使aftbl、aftmlzui后浓度均为0.1 ng·ul-1。
aft保留时间及标准色谱图：保留时间（min） ：aftm1 3.36，aftg1 4.72，aftb1 16.00，ft g2 10.12，aftb2 14.40。
6.说明
①本法应在1天内完成检测，否则结果偏低。
②层析柱中硅镁吸附剂应先用氯仿调为糊状加入。