在高效液相色谱仪中，固定相是色谱柱中的填料，通常是固体或固定在固体基质上的液体。流动相是经过泵输送的液体，通常是一种溶剂或混合溶剂。
当样品溶液进入色谱柱时，各组分在固定相和流动相之间进行分配。由于不同组分在两相之间的分配系数不同，它们在流动相中的移动速度也会有所不同。经过一段时间后，各组分会按照其在固定相和流动相之间的分配系数依次流出色谱柱。
在流动相通过色谱柱的过程中，各组分的浓度会不断变化。这种浓度变化可以通过检测器进行检测并转换为电信号。这些电信号可以记录下来并生成色谱图，从而展示各组分的分离情况。
高效液相色谱仪的色谱柱通常具有较高的柱效，即能够分离的组分数量较多，而且各组分的分离效果也较好。这主要是因为高效液相色谱仪使用的填料颗粒较小，可以增加固定相与流动相之间的接触面积，从而提高分离效率。
除了色谱分离的原理，高效液相色谱仪还经常结合其他检测技术进行样品的分析。例如，可以通过联用质谱技术（lc-ms）对分离后的组分进行定性和定量分析，从而提供更丰富的样品信息。
总之，高效液相色谱仪的分析原理是基于色谱分离的原理，通过固定相和流动相之间的物理化学性质差异实现各组分的分离和分析。它广泛应用于生命科学、药物研发、环境监测等领域，为复杂样品的分离和分析提供了重要的工具和方法。