应留心以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是经过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体外表的疏水基团间的效果,这种物理吸附长短特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质一般含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体外表。小分子必需依靠和大的蛋白载体偶联后才干固定在固相载体上。
还有有的包被原可能不是蛋白,关于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事前对其改造再加以包被,亲和素生物素:先亲和素先包被载体,参加生物素化的dna,这种包被办法均匀、结实,已扩展应用于各种抗原物质的定量测定。常用的包被液除了刚才说到的ph9.6碳酸盐缓冲液,还有ph7.2的磷酸盐缓冲液和ph7-8的tris-hcl缓冲液等等。
