*合成酶(glutamine synthetase,gs)活性检测试剂盒商品货号:ms1807
英文名称:micro glutamine synthetase(gs)assay kit
别名:*合成酶试剂盒 gs kit *合成酶(gs)试剂盒 *合成酶(gs)测试盒
检测方法:微量法
商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
ms1807-100管/48样 索桥生物 100管/48样 ¥550.00元
产品详细介绍
测定意义:
gs(ec 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和*合成*,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且*也是氨的主要储存和运输形式。
测定原理:
gs在atp和mg2+存在下,催化铵离子和*合成*;*进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成的络合物在540nm处有大吸收峰,可用分光光度计测定。
产品说明书
货号: qs1807 规格:50管/24样
谷胺酰胺合成酶(glutamine synthetase,gs)试剂盒说明书 可见分光光度法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
gs(ec 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷 氨酸合成*,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且*也是氨的主要储 存和运输形式。
测定原理:
gs 在 atp 和 mg2+存在下,催化铵离子和*合成*;*进一步转化为 γ ─ 谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在 540nm 处有大吸收峰, 可用分光光度计测定。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研钵、冰和 蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:30ml×1 瓶,4℃保存。
试剂一:10ml×1 瓶,-20℃保存。
试剂二:10ml×1 瓶,-20℃保存。
试剂三:粉剂×2 瓶,-20℃保存。用时每瓶加入 5ml 蒸馏水充分溶解备用,用不完的试 剂仍-20℃保 存。
试剂四:10ml×1 瓶,4℃避光保存。
样本测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(ml)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 提取液),超 声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200w,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃ 离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1ml 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、在 ep 管中加入下列试剂:
试剂名称(μ l) 测定管 对照管
试剂一 320
试剂二 320
试剂三 140 140
样本 140 140
混匀,37℃(哺乳动物)或 25℃(其他物种)准确水浴 30min
试剂四 200 200
混匀,静置 10min 后,5000g,25℃离心 10min,取上清液测定 540nm 处的吸光值 a。△a=a 测 定管-a 对照管。每个测定管需设一个对照管。
gs 活力单位的计算:
1、血清(浆)gs 活性 单位定义:每 ml 血清(浆)在每 ml 反应体系中每 min 使 540 下吸光值变化 0.01 定义为一个 酶活力单位。
计算公式:
gs(u/ml)=δ a×v 反总÷v 样÷0.01÷t =19×δ a
2、组织、细菌或细胞 gs 活性
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义为一 个酶活力单位。
gs(u/mg prot)=δ a×v 反总÷(cpr×v 样)÷0.01÷t =19×δ a÷cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每 g 组织在每 ml 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义为一个酶 活力单位。
gs(u/g 鲜重)=δ a×v 反总÷(w× v 样÷v 样总)÷0.01÷t =19×δ a÷w
(3)按细菌或细胞密度计算 单位定义:每 1 万个细菌或细胞在每 ml 反应体系中每 min 使 540nm 下吸光值变化 0.01 定义 为一个酶活力单位。
gs(u/10^4cell)=δ a×v 反总÷(500×v 样÷v 样总)÷0.01÷t =0.038×δ a
v 反总:反应体系总体积,0.8ml; v 样:加入样本体积,0.14ml;v 样总:加入提取液体积, 1 ml;t:反应时间,30 min;cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;w:样本质量,g;500:细菌或 细胞总数,500 万。
系列产品及单价
氮代谢系列
qs1800 硝酸还原酶(nr)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 240
ms1800 硝酸还原酶(nr)测试盒 微量法 100管/48样 450
qs1801 *合成酶(gogat)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 500
ms1801 *合成酶(gogat)测试盒 微量法 100管/96样 950
qs1802 *酶(gls)测试盒 可见分光光度法 50管/48样 580
ms1802 *酶(gls)测试盒 微量法 100管/96样 1100
qs1803 *脱氢酶(gdh)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 580
ms1803 *脱氢酶(gdh)测试盒 微量法 100管/96样 1100
qs1805 水土中亚硝酸盐含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样 140
ms1805 水土中亚硝酸盐含量测试盒 微量法 100管/48样 270
qs1806 食品中亚硝酸盐含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样 200
ms1806 食品中亚硝酸盐含量测试盒 微量法 100管/96样 380
qs1807 *合成酶(gs)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 280
ms1807 *合成酶(gs)测试盒 微量法 100管/48样 550
qs1808 植物硝态氮测试盒 可见分光光度法 50管/48样 360
ms1808 植物硝态氮测试盒 微量法 100管/96样 700
qs1811 植物氨态氮测试盒 可见分光光度法 50管/48样 500
ms1811 植物氨态氮测试盒 微量法 100管/96样 960
qs1812 尿素氮测试盒 可见分光光度法 50管/48样 70
ms1812 尿素氮测试盒 微量法 100管/96样 100
qs1813 亚硝酸还原酶(nir)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 650
ms1813 亚硝酸还原酶(nir)测试盒 微量法 100管/48样 1250
qs1814 脲酶(ue)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 380
ms1814 脲酶(ue)测试盒 微量法 100管/48样 750
