1.将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原，洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2.加稀释的样本，保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
3.加酶标抗抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
人胃泌素17(g-17)elisa试剂盒常见问题解决：
问：结果显色淡，灵敏度偏低是什么原因？
科顺技术:包被抗体遭到破坏
解决方案：操作温和，移液枪不能碰到孔底
科顺技术:tmb底物孵育时间过短，因非人为因素影响，需要优化孵育时间
解决方案：确定合适的孵育时间：人为判定-zui高浓度的标准品出现深蓝色；s4-5有淡蓝色；机器判定620 nm波长下测定od值达到0.6-0.65