①停止培育，将培育液吸出，用pbs洗培育物一次。
②给培育瓶内参加1ml 0.25％*溶液，于37℃消化3～5min 。期间不断在镜下调查。当细胞变圆挨近脱壁时，弃消化液。
③参加一定量的培育液（假如这些培育细胞不再有用，可加pbs），用吸管吹打，使细胞脱壁而制成细胞悬液。
2.计数与核算过程
①在细胞计数板*放置计数的盖玻片。
②用玻璃虹吸管吸取细胞，让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹蹧处流出悬液，至盖玻片被液体充满停止。
③置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。关于压线的细胞只计数在上线和左线者，关于细胞团按单个细胞计数。
④按下式计数细胞悬液的密度：细胞密度＝（4个大格细胞总数/4）×104个/ml 。
二、注意事项：
①务必使涣散成单个细胞，取样计数前，充分混匀细胞悬液。
②显微镜下计数时，遇到2个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞核算。假如细胞团>10％，阐明细胞涣散不充分。
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