反相分离柱c18的适用范围
c18反相分离柱广泛应用于天然产物的提取，药1物合成研究与开发，生物制药等领域。若样品*性偏大， rf值非常接近，则不能分离正相模式；终产物要求纯度98%以上，采用正相模式达不到；样品在正相条件下存在溶解问题——不妨考虑采用反相c18模式分离。由于其填料粘合技术的成熟和良好的分离能力，c18柱已成为日常接触分离提纯研究人员*多的反相柱。
反相式c18反相分离柱的主要参数
分离柱c18有多种参数，大致可分为四个方面：相键(包括修饰、封端)、填充载体(硅胶纯度、填充颗粒类型、粒径、孔径)、柱体本身(柱效、柱内径、柱长)和隐藏参数(比表面积、碳含量等)。小编想选择以下几个大家容易忽略的
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反向作用机制：
反相萃取分离主要是利用固相萃取材料官能团与目标化合物碳氢键之间的非*性作用力。反相非*性的 spe柱通常更适合从*性基质中提取分离出非*性和中等*性的目标化合物。
对利用非*性作用力吸附于非*性 spe柱的目标化合物，可用氯1仿、环己1烷、乙1酸乙1酯等具有非*性的溶剂洗脱。当溶剂的洗脱强度足够大，可以使目标化合物与吸附剂非*性基团间的范德华力不受影响时，使其在 spe柱中顺利洗脱。即使是*性更强的甲1醇，对许多化合物而言，也有足够的非*性力量来洗脱它。有时候，单种溶剂无法完全洗脱疏水性的目标化合物，可以考虑使用二氯甲1烷：乙1酸乙1酯(1:1，体积比)。
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防爆柱结构：
管柱：一种吸附剂载体，由级聚制成，c18固相萃取柱类型，一般呈形状。有些制造商还提供玻璃柱用于特殊分析(例如 paes分析)。圆柱管端部出口尺寸已标准化，可用于不同厂家固相萃取多管真空装置。
筛选板：对吸附液和过滤液进行固定。聚乙烯是一种常用的筛板材料，对其进行特殊分析还可以采用特氟隆，不锈钢片或玻璃等材料。
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吸附剂：固体萃取柱中起分离作用的物质。早些时候还广泛用于柱色谱的al2o3、 florisil、石墨化炭黑等吸附剂，现在仍然在固相萃取过程中使用；现在常见的吸附剂是由各种球形硅胶颗粒键合官能团制得的硅胶吸附剂；上世纪后期发明的有机聚合物吸附剂，如聚二乙烯基苯-n-乙烯*酮，已在许多应用中取代了硅胶键合吸附剂。
辅助设备：储样器，增加柱管上的容器体积，保定c18固相萃取柱，提高单次上样量；适配器，将柱管和柱管、柱管和储样器连接起来。
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近几年来，分析检测技术取得了长足的进步，但样品前处理仍是科研工作者面临的挑战。以下由小析姐与大家聊聊固相萃取小柱法开发中需要注意的问题。
固相萃取(solid phase extraction，简称 spe)是20世纪70年代中期发展起来的样品前处理技术，其用途广泛，并日益受到人们的欢迎。按其不同的吸附填料和吸附机理，c18固相萃取柱分类，主要分为正相、反相、离子交换和混合固相萃取小柱。正相、反相固相萃取小柱主要用于萃取*性和非*性化合物，而对某些带电物质(离子化合物)的萃取回收率较低，例如c18固相萃取小柱，当目标化合物处于离子状态时，c18对该化合物的能力因子显著降低。
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正相态时，溶液体系的*性应按样品溶剂、淋洗溶剂、洗脱溶剂的顺序递增，洗脱强度也随之递增。要确保所选的样本溶剂不会洗脱目标物，所选的淋洗液应在不洗脱目标物的前提下，*大限度地洗脱干扰物，这样洗脱目标物才能碰巧完全洗脱目标物。鉴于大部分化合物都具有多种功能基团，在实际操作中，主要根据目标物和干扰物的性质考虑采用何种萃取机理。例如：2-萘胺为弱碱性化合物(pka=4.16)，在一定 ph条件下可呈阳离子化状态，同时又具有疏水和亲水基。此时可根据样品基质选择有利于目标物与干扰物分离的萃取机理。
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