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生物样品的采集制备和预处理

2025/9/19 9:01:33发布36次查看
生物样品的采集制备和预处理
一、生物样品采集
1、植物样品的采集
(1)采集的植物样品要具有代表性、典型性、适时性。
(2)布点方法
常采用梅花形五点取样法或交叉间隔取样法。
(3)采样方法
①采样前应预先准备好采样工具。
②根据实际情况确定样品采样量。
③选择优势种植物在采样区内按梅花形五点或交叉间隔取样方式采集5-10处的植株混合组成一个代表样品。
④将采好的样品装入布口袋或聚乙烯塑料袋中,贴好标签,并填写采样登记表。
2、动物样品的采集
(1)尿的采集
定性检测尿液成分时应采集晨尿。
定量检测尿液成分时一般采集24h总排尿量。
(2)血液的采集
一般用注射器抽取10ml血样冷藏备用。常用于分析血液中所含金属毒物及非金属毒物。
(3)毛发和指甲的采集
采集和保存较为方便,主要用于汞、砷等含量的测定。
(4)组织和脏器采集
二、生物样品的制备
对于液体状态的动物样品常无需制备,对动物组织和脏器主要是采用捣碎的方法制成浆状鲜样备用,而对植物样常根据不同情况,利用不同方式进行样品制备。
植物样品的制备
(一)平均样的获得
四分法、切成块的1/4-1/8混合
(二)分析试样的制备
1、鲜样
2、风干样:60-70摄氏度低温真空干燥箱中烘干(匀浆、小片)
3、水分含量测定(100-105摄氏度烘干/真空干燥/低温烘干)
三、生物样品的预处理
常用的预处理方法有湿法消解法、灰化法、提取、分离和浓缩法等。
1、湿化消解法
利用强酸等与生物样品共同煮沸,将样品中有机物分解成二氧化碳和水除去。
常用的消解试剂体系有浓硝酸-高氯酸、浓硝酸-浓硫酸、浓硫酸-过氧化氢等。
2、灰化法
利用坩埚或氧,使样品在高温条件下分解,并用适当的溶液溶解或吸收分解产物,制成分析试液。
3、提取法
整个过程包括提取、分离、浓缩三个步骤。
(1)提取
应根据样品的特点、待测组分的性质、存在形态和数量、以及分析方法等因素选择,常用方法有:
1、振荡提取法
2、组织捣碎提取法
3、脂肪提取器提取
4、直接球磨提取法
(2)分离
用提取剂从生物样品中提取欲测组分的同时,不可避免的会将其他相关组分提取出来,因此,在测定之前,还必须将上述杂质分离出去。常用的分离方法有:液-液萃取法、层析法、磺化法、低温冷冻法、吹蒸法、液上空间法等。
(3)浓缩
当生物样品的提取液经过分离净化后,其中的污染物浓度往往仍达不到分析方法的要求,需要进行浓缩和富集,常用方法有:蒸馏或减压蒸馏法、k-d浓缩器浓缩法、蒸发法、真空冷冻干燥法等。
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