1. 将450ul 标本稀释液加入到一支 1.5ml 进口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血浆标本。
2. 加20ul 1 n hc i ,盖紧，上下混匀。 2 － 8 ℃ 放置60± 2 分钟。
3. 加20ul 1 n naoh, 盖紧，上下混匀。
4. 即用，或放-20/-70 ℃ 保存3 天。计算结果时乘 以稀释倍数 50 。 （ 注意：不同的标本e2f1 的水平可能有较大差异，请根据实际情况灵活掌握稀释度）
5. 细胞培养上清或组织匀浆 10 倍稀释 (410ul 的标本稀释液＋ 50ul 样本＋ 20ul 的 1n hci+20ul 的 1n naoh) 。
结果计算与判断
1. 所有 od 值都应减除空白值后再行计算。
2. 以标准品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 为横坐标， od 值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。
3. 根据样品 od 值在该曲线图上查出相应 e2f1 含量 ，再乘上稀释倍数即可 。
试剂盒性能
1. 灵敏度 ： 最小的e2f1 检测浓度小于 15 pg/ml。
2. 特异性： 可同时检测重组或天然的人 e2f1 。 不与 人其它细胞因子有交叉反应。
3. 重复性：板内、板见变异系数均小于8.9％。
人骨肉瘤细胞；hos
人慢性髓系白血病细胞；k562
人前列腺癌细胞；lncap
人乳腺癌细胞；mcf 7b
人急性淋巴母细胞性白血病细胞；molt-4
人小细胞肺癌细胞；nci-h209
黑人burkitt淋巴瘤细胞；raji
人b淋巴细胞瘤细胞；ramos
人b淋巴细胞瘤细胞；ramos(ra.1)
人脑瘤细胞；sf126
人脑瘤细胞；sf763
人脑瘤细胞；sf767
人皮肤黑色素瘤细胞；sk-mel-1
人肾上腺皮质癌细胞；sw-13
人结直肠癌细胞；t84
人急性单核细胞白血病细胞；thp-1
人神经胶质细胞瘤细胞；u251
人组织细胞淋巴瘤细胞；u937 [u-937]
人胃腺癌细胞；bgc-823
人低分化肺腺癌细胞；glc-82 [glc82]
人喉癌上皮细胞；hep-2
人纤维肉瘤细胞；ht-1080
人绒癌细胞；jeg-3
人耐vp16绒癌细胞株；jeg-3/vp16
白介素-2转染耐vp16绒癌细胞；jeg-3/vp16-il-2
tnfa转染耐vp16绒癌细胞；jeg-3-vp16-tnfa
人急性t淋巴细胞白血病细胞；jurkat, clone e6-1
人神经母细胞瘤细胞；be(2)-m17