在病理检验中,脂类染色法常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用广泛的染料是苏丹染料,常用的有苏丹ⅲ,苏丹ⅳ,苏丹黑及油红o等。苏丹类的油红o染料在脂类中的溶解度大于在有机溶剂的溶解度,所以染色时染料便从染液中转移到被染的脂质中去,使脂质显现出红色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果好。根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)对组织切片染色效果是有好处的。
实验流程:
1、 固定:将冰冻切片复温干燥10min;细胞爬片4%多聚甲醛固定15min,pbs漂洗3次,5min/次。
2、 染色:入油红o工作液孵育10-15min;细胞爬片破膜10-15min,pbs漂洗3次,5min/次,入油红o工作液37°染色1-2h。
3、 分化:75%酒精分化2s,水洗1min。
4、 复染细胞核:harris苏木素复染1-2min左右,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。
5、 封片:用纸巾吸去周边水分,甘油明胶封片。染色结果:脂滴呈橘红色至鲜红色,细胞核蓝色。
实验结果展示:
