1. 灵敏度。
灵敏度常用支原体*组的拷贝数或支原体菌株的cfu表示。
2. 特异性和广谱性。
质量好的*盒应检测的支原体物种越多越多,并且特异性强,即只针对支原体,不针对其他*等微生物,没有交叉反应。
3. 稳定性。
冻干粉比液体*的稳定性高。
4. 样本类型及样本处理。
一款好的*盒,会标出它适合的样本类型,也会说明如何处理样本。要注意有的样本含有*pcr反应的物质,因此需要处理。
5. 对照品。
一个好的*盒,会带有阳性对照和内控对照。内控对照是用于监测pcr是否正常。如果样本含有*pcr的物质,则内控对照的条带会发生缺失。有严重支原体污染的样本由于样本中的支原体对内控对照产生了竞争性*,因此支原体条带越强,内控条带越弱
pcr方法已广泛用于科研,在工业中也有不断扩大应用的趋势,它包括检测一些病原体、检测支原体污染、检测*污染以及检测残留宿主dna等。
pcr在工业中的应用主要存在一个方法验证的问题,尤其是灵敏度的验证。灵敏度不够,就会发生漏检。另外,pcr所直接面对的样本是dna,而非病原菌或dna,rna纯化*,因此还需要做dna抽提,这也是要注意的。
因此,如能采用pcr检测支原体并替代药典方法,还是能节省很多时间和精力。但pcr方法的验证需要较为完整。灵敏度验证是一个重要方面。灵敏度不够,就会发生漏检。《欧洲药典》第2.6.7章(ep 2.6.7)和《日本药典》第十七版第g3章(jp g3),都规定,对于核酸扩增法(如pcr)检测支原体,如替代传统的培养法,都要求检测限达到10 cfu/ml。
具体验证可使用10cfu的支原体灵敏度标准品,它一般为冻干粉形式,需要用待测样本的样本基质(需保证里面不含支原体)来复溶,再进行dna抽提以及pcr检测。如检测的电泳有条带,或者qpcr检测后的ct值小于40,即表明检测成功。
多酚氧化酶(ppo)活性检测*盒(比色法),#ktb1140:多酚氧化酶(ppo)能够催化catechol产生醌,后者在525 nm有特征光吸收,测定525 nm光吸收增加的速率进而计算多酚氧化酶(ppo)活性。该*盒适用的样本范围广泛包括serum、血浆、组织、细胞、*;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。
血钾(k?)检测*盒(比色法),#ktb2100:serum中钾离子(k )与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比;通过测定其浊度来测定serum钾含量。该*盒提供了一种简单的检测方法检测serum样本中钾离子(k )的含量水平;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。
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