样品前处理首先对样品进行预处理，称取 2 g 磨碎的牛肉置于 50 ml 离心管，添加 10 ml 乙腈。将离心管强力涡旋 2 min。试管中加入正己烷(5 ml)，涡旋 1 min。然后，将试管在 4 °c 下以 5000 rpm 的速度离心 5 min。丢弃所有上清液。将乙腈层转移至另一试管，添加10 ml 浓度为1 m 的盐酸水溶液。然后将试管涡旋 1 min，用于固相萃取。图 1为样品提取步骤。先后采用 3 ml甲醇和 3 ml水预处理 agilentbond elut plexa pcx 小柱（60 mg，3 ml，部件号 12108603）。提取物（相当于 2 g 样品）以 1 ml/min 的速度通过小柱。当样品全部通过小柱后，用 5 ml 0.1 mol/l 盐酸水溶液和 5 ml 甲醇淋洗小柱。小柱在负压（低于 2.0 kpa）下干燥 5 min。使用 5 ml25% 氢氧化铵的乙腈溶液对样品进行洗脱。收集洗脱液并在 40 °c以下使用氮气吹干。用 15 % 甲醇水溶液 (v:v) 溶解样品残渣并定容到 1.0 ml，经 0.2 µm 滤膜过滤，然后采用 lc/ms/ms 进行分析。
结果与讨论：
线性和检测限将混合工作溶液加标至空白基质中，制得用于创建外标校准曲线的溶液（0.25 µg/kg、0.5 µg/kg、1 µg/kg、2 µg/kg 和 5 µg/kg）。牛肉经过整个流程（包括预处理和 spe 步骤），得到空白基质。将各种化合物信噪比高于 3:1 时的浓度作为检测限 (lod)。校准曲线和 lod 的结果列在表 2 中。
回收率与重现性测定高低不同浓度级别氨ben砜的回收率（表 3）。通过比较 spe提取前加标样品的 mrm 峰面积和 spe 提取后的加标样品（后加标）mrm 峰面积计算回收率。图 2 所示为低浓度氨ben砜加标于空白牛肉样品分析所得的色谱图。图 3 为空白样品。
结论：使用 agilent bond elut plexa pcx spe 分析牛肉中的氨ben砜具有良好的回收率和重现性。bond elut plexa spe 联用 lc/ms/ms分析，可实现肉类样品中 ppb 级浓度以下氨ben砜的高灵敏度定量分析。
关键词：色谱柱