核酸检测试剂盒所用到的rt-pcr技术原理:
rt-pcr,实际上是反转录pcr,又称逆转录pcr。国际上的约定俗成的是:rt-pcr特指反转录pcr,而real-time pcr一般缩写为qpcr(quantitative real-time pcr)。
rt-pcr原理是提取组织或细胞中的总rna,以其中的mrna作为模板,采用随机引物利用逆转录酶反转录称cdna。再以cdna为模板进行pcr扩增,而获得目的基因的表达。rt-pcr使rna检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量rna样品分析成为可能。
rt-pcr技术灵敏而且用途广泛,可用检测细胞、组织中基因表达水平,细胞中rna病毒的含量和直接克隆特点基因的cdna序列等。如果用于定量检测,就是qpcr,此次病毒核酸检测荧光pcr技术就是基于此。
