液相色谱在药物分析中的应用,主要考虑试样的预处理和分析柱、检测器的选择。在试样的预处理上,日前兴起的固相(微)萃取使得许多含量低的成分得到精制提纯,从而适于液相色谱的测定,而采用逆流萃取测定川芎嗪含量取得了好的效果。中药中有些紫外吸收弱,或无特征紫外吸收的成分,直接用液相色谱测定,其灵敏度和分离度都不尽人意,利用柱前或柱后衍生化法可使这些成分较地测定出来。对于性大、脂溶性差物质,在ywgcl8柱上不易保留,用十二烷基磺酸钠作为离子对试剂,降低其性,延长柱上的保留时间,取得较好的分离较果。将液相色谱和质谱这两个有力的分析技术在线连接在一起,经过三十年的发展已成为一项较为成熟的分析手段,但是它从形成伊始就存在着问题:从液相色谱流进质谱时,流动相的变化、溶剂的组成、温压离子化的问题制约着这种联用技术发展,大气压离子化接口具有去除溶剂和离子化的双重功效,它的引入,使得该技术在各个领域得到了的应用。电喷雾离子源是一种软电离技术,一般只生成(m h) 和(m-h)-两种分子离子峰,选择性监测(mz)190的负分子离子峰,具有较的灵敏度、度、一性,满足了低浓度药物研究的需求。由张莉等人研究的三维液相色谱法可以同步测定*和阿魏酸两种指标。通过实验证明:如果选择合适的柱温等色谱条件,乙醇作为反相液相色谱流动相,分析中药及中成药中成分,既安又。
结构相似的物质,普通的检测器难以检测出来,液相色谱-电化学法可以地测定黄连粉中仅差一个基团的*和黄芩素的含量。样品经色谱柱分离后收集,再经荧光分光光度计测荧光度,影响因素多,测定复杂,改进后的液相色谱-荧光法则可以不经衍生化和收集分离物,只经化学处理除杂,浓缩后直接进样即可。用该法测定贯叶连翘中金丝桃素的含量也取得了较好的结果。
液相色谱-示差折光测*口服液中黄芪甲苷的含量也都取得了较为满意的结果。对于只有紫外末端吸收,用紫外检测时灵敏度低,基线易漂移,示差折光检测其易受外界条件干扰,蒸发散射检测器能克服以上不足,响应值只与样品质量有关,其信号相应与质量成正比,不同化合物,质量相同则信号相应基本一致。蒸发光散射检测法是基于不挥发样品分子对光的散射程度与其质量成正比,与其所含基团性质无关。
只要选择适当的检测器参数,便可使流动相和溶剂*气化,不产生信号,而样品中的各个组分以不挥发粒子存在,对光有散射,以被检测出来。因此,蒸发光散射检测器可用于含不同基团的多组分同时分离、分析。和紫外、荧光等方法相比,蒸发光散射检测法对不同物质有近似相同的响应因子,因而不出现低浓度、响应或浓度、低响应的现象,有利于不同比例混合物的测定.液相色谱-蒸发光散射检验法测定银杏叶中萜类内酯含量、红参及育精胶囊中人参皂苷rg1和re的含量和藤黄中藤黄酸含量都得到了好的结果。