您好,欢迎来到三六零分类信息网!老站,搜索引擎当天收录,欢迎发信息

色谱柱清洗方法及技术交流

2025/7/5 5:23:57发布27次查看
吸附的主要原因反相硅胶柱填充介质(固定相)与样品间常常会发生下列吸附现象:(1) 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附;(2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附;(3) 疏水性的物质在柱中的蓄积。以上现象,会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生清洗方法1、疏水性物质的去除:使用有机溶剂(乙腈、甲醇、乙腈与thf的混合溶剂)进行清洗。 考虑样品成分对于有机溶剂的溶解性,选用比淋洗液浓度高的有机溶剂、或选用极性较低的有机溶剂进行过柱清洗。这种情况下,有必要注意淋洗液中盐的析出现象。2、碱性物质(金属配位物质)的去除:使用酸性水溶液与有机溶剂的混合液(0.1%磷酸、0.1%tfa/乙腈、甲醇的混合液)进行过柱清洗。*一般来说,清洗时间可选择为过柱5-10个柱体积便可。在附吸成分其吸附力时,即使进行过清洗,柱性能也有可能得不到恢复。另外,请充分考虑淋洗液的ph值,以避免损坏色谱柱。 液相色谱柱的结构说明 液相色谱柱的结构:
1、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。
柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。
在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。
2、柱填料:
液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。
正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10?m的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—cn,-nh2等官能团即所谓的键合相硅胶。
反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ods)的非极性填料。也有无定型和球型之分。
常用的其他的反相填料还有键合c8、c4、c2、苯基等,其颗粒粒径在3—10?m之间。
该用户其它信息

VIP推荐

免费发布信息,免费发布B2B信息网站平台 - 三六零分类信息网 沪ICP备09012988号-2
企业名录 Product