1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2、设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度elisa试剂盒的标准品50μl。
3、待测样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl。
4、随后标准品孔和样本elisa试剂盒孔中（空白孔不加）参与辣根过氧化物酶（hrp）符号的检测抗体100μl，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6、全部孔参与底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7、全部elisa试剂盒参与停止液50μl，15min内，在450nm波利益测定各孔的od值。
elisa试剂盒注意事项：
elisa试剂盒在2-8℃，运用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这归于
正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再运用；实验中不必的板条应立即放回自封袋中，密封（低温
干燥）保存；浓度为0的s0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照elisa试剂盒说明书操作时样本
现已稀释5倍，终结果乘以5才是样本实际浓度；严格按照说明书中标明的时刻、加液量及次序进
行温育操作。全部液体组分运用前充沛摇匀。