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进口elisa试剂盒法检测细胞间黏附分子-1

2025/6/21 13:56:49发布22次查看
进口elisa试剂盒采用双抗体夹心elisa法。抗人slcam-1单克隆抗体包被于微孔板上,加入标本/标准品,使之与板上抗体结合,再加入hrp标记的单克隆抗体,未结合的部分被洗去,加入hrp的底物,若反应孔中有slcam-1,将出现显色反应,加终止液终止反应。在450nm处测od值,si-cam-1浓度与od值之间成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中icam-l的浓度。
[试剂]
1.包被有抗人slcam-1抗体的微孔板1块
2.hrp结合的抗人slcam-1单克隆抗体0.1ml/瓶
3.0.5ml 100ng/ml slcam-1标准品2瓶
4.50ml浓缩洗涤液20x1瓶
5.5ml浓缩检测缓冲液20xl瓶
6。12ml样品稀释液1瓶
7.12ml tmb底物溶液1瓶
8.12ml终止液1瓶
9.封板胶纸2张
[仪器] 酶标仪或全自动酶联免疫检测
[检测步骤]
1.使用前先混匀所有试剂,应注意避免起泡。
2.确定好空白、标准及待测所需孔数(每一份标本、标准品、空白及随机选择的对照应测两次)。
3.从已平衡至室温的密封袋中取出所需的板条,洗板。
4.加样,在空白孔、标准品孔中加入100u1样品稀释液,在待测孔中加入90u1样品稀释液。
5.每份标本取10ul加入待测孔中,混匀。
6.在所有孔中加入50ul已稀释的hrp结合物,用封板胶纸封住反应孔,置于100rpm摇床上室温环境中(18~25℃)孵育1h,洗板。
7.在所有孔中加入100ul tmb底物稀释液,包括空白孔。置于100rpm摇床上,避光室温环境中(18~25℃)孵育约10min(视显色深浅灵活掌握)。
8.进口elisa试剂盒加入终止液(100u1/孔)终止反应,混匀后即刻测量od450值。
注意:若孵育时未使用摇床则所获od值较低,但仍然有效。
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