[实验器材]
1．仪器
原代细胞倒置显微镜，co2培养箱，普通冰箱，超净工作台，低速冷冻离心机，显微数码摄影系统．水浴锅。
2．材料与试剂
(1)非无菌材料酒精棉球，离心管架，血细胞计数板，擦镜纸，记号笔，废液缸，甲醇·冰醋酸，giemsa染液．秋水仙素，2×ssc液，30w紫外灯，水浴，饭盒。
(2)无菌材料和试剂辅料镊，6孔细胞培养板，培养瓶，15ml离心管，长丝滴管，10ml刻度移液管．灭菌塑料吸嘴，10％bs培养液，添加有0.02％edta的0.25％胰蛋白酶消化液．无菌hank’s液，1.0mg／ml．brdu溶液，1mol／l hcl溶液。
(3)细胞材料悬浮细胞培养物，贴壁细胞培养物。
[操作步骤]
1．取对数期生长的单细胞悬液，以一定密度接种在培养瓶或培养孔中。
2．当培养细胞进入对数生长期时，向培养液中加入brdu，使z终浓度为10μg／ml。
3．培养44~54h后，加入秋水仙素，终浓度为0.1μg／ml。
4．继续培养4~6h后，常规消化细胞至离心管中，原代细胞注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。
5．常规染色体制片。
6．有细胞一面向下，将染色体玻片放在一饭盒中的玻璃支架上，加入2×ssc液以不超过标本表面为宜，然后在标本上覆盖一张擦镜纸，使纸的两边浸入2×ssc液中，以保持标本的湿润。
7．将饭盒放在56℃水浴锅中，湿育，上面用30w的紫外灯管6~10cm垂直照射30min。
8．弃去2×ssc液和擦镜纸，立即用4℃左右的流水冲洗。
9．giemsa液染色5~10min，流水冲洗，干燥后镜检。
10．镜检100个细胞的分裂相，统计m1、m2、m3、m4细胞期(对应前期、中期、后期和末期这4个细胞分裂时期)分裂指数。
11．根据下式计算细胞周期
细胞周期(tc)=48／[(ml+2m2+3m3+4m4)／100](h)
[注意事项]
1．秋水仙素的加入时机会因细胞的类型、生长速度有所差异。
2．原代细胞加入brdu后应避光培养。