elisa试剂盒操作用于检查不知道抗原的双抗体夹心法:
1.包被:用0.05mph9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反响孔中加0.1ml,4℃ 过液。次日,弃去孔内溶液,用洗刷缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗刷,下同)。
2.加酶标抗体:于各反响孔中,参加新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗刷。
3.停止反响:于各反响孔中参加2m硫酸0.05ml。
4.成果判定:可于白色布景上,直接用肉眼调查成果:反响孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反响为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+、“-号表示。也可测od值:在elisa检查仪上,于450nm(若以abts显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔od值,若大于规定的阴性对照od值的2.1倍,即为阳性。
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