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高效液相色谱法测定紫苏子油中的α—VE(上)

2025/4/13 17:09:14发布52次查看
摘要:用高效液相色谱法对紫苏子油中的α—ve含量进行了测定,并研究α—ve作为抗氧化剂在紫苏子油储存过程中的含量变化。高效液相色谱系统采用正相硅胶柱,正己烷/异丙醇(99.8/0.2)作流动相,流速为0.8ml/min,采用荧光检测器,激发光波长为292nm,发射光波长为325nm。α—ve在41.0~1024.0μg/g呈线性,线性方程为y=100.16x-3600.73(r=0.9996)。分析方法中α—ve的三个水平的平均回收率为79.71%,并具有较好的精密度[天内rsd2.11%(n=5)]。α—ve最低检测浓度为7.42μg/g,定量浓度为14.84μg/g。schaal烘箱法(63±1℃)的实验表明,紫苏子油中作为抗氧化剂加入的α—ve,其含量随实验时间的延长,将逐渐减少。0.01%、0.03%、0.05%三个浓度的加入量进行比较,浓度较高的,其随时间增加而损失的量则相对较低。
关键词:高效液相色谱;α—ve;紫苏子油
0前言
紫苏系唇形科多年生草本植物,在我国具有极为广泛的资源,它属于第一批被中国卫生部确定的既是食品又具有医药保健功能的物质。紫苏种子中的α—亚麻酸含量高达50%以上,高含量α—亚麻酸使其成为高种植率和高利用价值的油料作物资源。但是,由于紫苏子油中含有多种不饱和脂肪酸,极易氧化,这使紫苏子油也易发生氧化、酸败。紫苏子油氧化、酸败的产物会改变油的质量,对人体健康产生不利的影响,因此研究其氧化、酸败的过程对开发紫苏子油产品是很有必要的。α—ve是一种天然抗氧化剂,它既是具有特殊生物活性的营养物质,又具有抗氧化的作用,紫苏子油中本身含有一定量的ve,但是紫苏子油经过精制后其原有的ve有一定损失,如果人为地加入一定量的ve不仅会保持紫苏子油的物理化学性质及其生物活性,还能延长紫苏子油的保存期。本文将α—ve在紫苏子油的氧化过程中的变化作为重点之一,建立一个能准确测定紫苏子油中ve含量变化的检测方法,对研究ve在紫苏子油及其它油脂中的性质均有重要意义。
1实验仪器和材料
1.1仪器
高效液相色谱系统:
高效液相色谱仪waters510(美国沃特斯公司);
液相色谱柱:watersμporasiltm-27477,3.9mm×30cm(美国沃特斯公司);
荧光检测器:shimadzurf-540(日本岛津公司)。
1.2试剂
α—ve对照品(瑞士生产,含量大于99%);其它试剂均为分析纯。
2实验方法
2.1紫苏子油的制备
紫苏子经电磨机粉碎后,加入正己烷浸泡(比例为1.1),浸提时间为24h,温度35℃。浸提3次后,合并浸提液并抽滤,滤液用旋转蒸发仪减压蒸出溶剂,得黄色透明紫苏子粗油。
2.2高效液相色谱条件
流动相:正己烷/异丙醇(99.8/0.2,v/v);
流速:0.8ml/min;
进样口:7725型,loop20μl;
检测器:荧光检测器,激发光波长:λ=292nm,发射光波长:λ=325nm;
色谱柱:μporasiltm-27477,3.9mm×39cm。
2.3ve的高效液相色谱分析方法
取从紫苏子油中提取ve样品,用10ml棕色容量瓶定容,hplc流动相稀释并定容。以0.45μm的微孔滤膜过滤后,注入高效液相色谱仪,记录色谱图,并计算峰面积;另取α—ve对照品,用hplc流动相配成一定浓度的α—ve溶液,同法测定,按外标法计算。
样品中α—ve的含量(μg/g)=(a样/a标)×c标×v样/w样×稀释倍数
a样:样品中α—ve的峰面积;
 a标:α—ve对照品的峰面积;
 c标:α—ve对照品的浓度;
 v样:样品体积;
 w样:样品重量。
(待续)
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