ab液质联用仪色谱分离流动相的制备： 1 m乙酸铵溶液：溶解77 g甲酸铵于1 l hplc级的水中。 流动相a：在1 l hplc级的水中，加入1 ml甲酸，10 ml 1 m乙酸铵溶液。 流动相b：在100 ml水中，加入1 ml甲酸，10 ml乙酸铵溶液，混匀后，用hplc级的乙腈稀释到1 l。
样品制备（鱼、水产品） 基于bergwerff等人提出的方法[1]： 1．将2 ml ph=3.0的mcllvaine溶液、100 ml 1 m的p-tsa、50 ml的n,n,n,,n,-四甲基-1,4-苯乙烯二胺的甲 醇溶液(1 mg/ml)进行混合； 2．加入2 g匀浆的样品于50 ml螺丝加盖的聚丙烯管中； 3．涡旋混合； 4．加入12 ml乙腈； 5．振摇15 min； 6．15 ℃下，3400 r/min离心5 min； 7．加入ph=6.0的mcllvaine溶液； 8．加入12 ml乙腈； 9．振摇15 min； 10．15 ℃下，3400 r/min离心5 min； 11．合并上清液；12．加入6 ml 二氯甲烷； 13．15 ℃下，3400 r/min离心5 min； 14．有机相进行固相萃取。
基于effkemann等人提出的方法[2]： 1．称量2 g匀浆过的鱼肉组织； 2．加入100 µl内标溶液(d5-lmg，1 µg/ml)； 3．加入900 µl水； 4．加入2 ml盐酸羟胺溶液(5 g/l)； 5．振摇并放置10 min； 6．加入8 ml乙腈； 7．振摇10 min； 8．4 ℃下，3000 r/min离心5 min； 9．将上清液吸入样品，备用。 注意：新鲜的鱼肉提取后，应在几个小时内完成分析，以防止孔雀石绿、隐色孔雀石绿的降解。
色谱分离条件 agilent 1100 系统：g1312a二元泵系统、g1367a型自动进样器、柱温箱。 ab液质联用仪色谱柱：phenomenex synergi max-rp反相柱，50 mm×2 mm，4 µｍ，80 å。 流动相：a相—水 + 0.1%甲酸 + 10 mm 乙酸铵；b相—水 / 乙腈(10 / 90) + 0.1%甲酸 + 10 mm 乙酸铵。 梯度设置：