1. 固定上颌：拧松上颌固定装置的旋钮，向上移动使其在0上5mm，再旋紧旋钮。
2. 插入耳杆：动物麻醉后，将耳杆紧贴双耳分别插入两外耳道；然后将耳杆固定在主框上，并使两个耳杆的读数相同。
3. 固定上颌：调节“压环旋钮”使压环上移，将动物的上门齿钩住门齿板的前杆，使门齿根部紧靠杆的上缘；旋松调节槽上“固定旋钮”，在主框上前后移动至头自然伸展、然后固定；下移“压环旋钮”，夹紧头部。
二、脑立体定位仪的日常维护：
1．轻拿轻放，避免仪器碰撞而受损
2．选择实验对象不要超过仪器的适用范围
3．实验结束后要及时清理仪器，保证其性能
三、脑立体定位仪的实验过程：
1、首先参照大鼠脑立体定位图谱或者文献确定脑内注射部位的坐标，包括前囟前或后多少mm，中线左或右多少mm，颅骨下深度为多少mm。
2、麻醉大鼠，然后固定在脑立体定位仪上，主要是固定鼻端和两耳部位，固定后大鼠的头部是不能动的。
3、剪去大鼠头顶部毛，皮肤表面，然后根据需要纵向或者横向剪开皮肤，用棉球和*除去颅骨表面的脑膜，过一会颅骨干燥后找到前囟部位（靠前部的十字交叉点），以前囟部位为原点，参考定位坐标把注射针移动到注射部位的上方，
4、在颅骨相应的位置用签字笔点一个原点，移开注射针，用牙科转在注射部位转一个小孔，如果出血的话及时止血，再把注射针移回注射部位上方，吸入注射，然后再参照定位注射坐标把注射针移动到注射部位，开始缓慢注入，注射后留针一会，再缓慢把注射针移出脑内，缝合皮肤，肌肉注射*抗感染，把动物放回饲养笼内，术后注意保温。