噬菌体制备及定量的一般实验方案

大部分噬菌体展示方案都涉及这样一个基本步骤：从被感染的细菌中制备噬菌体或噬菌粒颗粒的储液（增殖），并滴定这些储液以测定有感染力的颗粒的浓度。对于噬菌体载体（以及辅助噬菌体），对于噬菌体载体（以及辅助噬菌体），要通过计数宿主菌菌苔上的噬菌体斑来测定这些可变颗粒的浓度。为了确保能得到一个能繁殖的噬菌体的纯培养物，任何时候增殖噬菌体载体或辅助噬菌体，按照这个步骤来进行噬菌斑的分离都是可取的。
对于噬菌粒载体，噬菌粒的滴定涉及对细菌的感染，以及对得到的抗生素耐受性的克隆的计数。
测定噬菌体或噬菌粒制备产物感染力的一个简便的替代方案是通过吸光度评估浓度。消光系数（extinctioncoefficient）取决于噬菌体颗粒的大小，而噬菌体颗粒的大小又取决于基因组的大小。一般而言，对于一个辅助噬菌体如vcsml3，lod270=1．1x1013个颗粒／m1。但基于吸光度的计算可能对能繁殖的、有感染力的颗粒的浓度评估过高。

噬菌体制备及定量的一般实验方案

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