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使用HRP标记链霉亲和素经常遇到的问题有哪些?
2024/12/28 0:01:58发布
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链霉亲和素是与亲和素具有相似性质的一种蛋白质,都具有与生物素特异结合的能力,结合常数高达10(15)m.同时,由于链霉亲和素等电点比亲和素低,且不含糖基链,故在检测中的灵敏度和特异性都高于亲和素,建立在此基础上的生物素-链霉亲和素系统的应用比生物素-亲和素系统有更大优势。
hrp标记链霉亲和素是指用hrp酶来标记特定链霉亲和素分子,这些亲和素分子通过hrp酶的氧化反应形成一定的物质可能具有磁性,可用于鉴别和分离特定的抗原。它由驱动素-过氧化物酶结合到抗体上,用来检测抗原的存在。它主要用于免疫细胞化学和免疫组织化学。
使用hrp标记链霉亲和素的常见问题:
1. 包被抗体或抗原不适,易产生阳性值较小,或产生变异,即跳管现象。
2. 用抗血清不纯化,或纯化程度太低的抗体包被,则阳性值较小,或没有阳性梯度。
3. 封闭不好或标记物过浓可产生对照值较高。
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