ttc(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),是一种脂溶性光敏感复合物,可用于检测种子的生存能力,或检测哺乳动物组织的缺血梗塞。其基本原理在于,ttc是呼吸链中吡啶——核苷结构酶系统的质子受体,能与正常组织中的脱氢酶反应生成不溶于水的红色三苯基甲臜(ttf)化合物。正常组织和有活力的种子中富含脱氢酶,可与ttc反应呈现红色,如果组织缺血梗塞死亡或种子生活力衰退,则不能与ttc反应,组织不能着色或染色很浅。据此可根据染色部位和深浅判定组织缺血梗塞程度或种子活力。
本产品ttc染液中ttc浓度为0.1%,适用于植物种子活力的染色。经染色后,有活力的种子呈红色,无生命力的种子呈白色或黄色。
操作步骤
样本前处理:种子放入水中30-35℃浸泡2-6 h或更长时间,使其充分吸胀。
染色步骤
1.ttc染液经37℃预热30 min。
2.种子剥离外壳或种皮,纵切均分成两瓣,放入洁净的离心管中。加入ttc染色(种子)浸没样本,37℃水浴锅避光染色30-60 min,期间每隔15 min观察种子着色情况。
3.当种子出现红色且不再变深时即可倒出染液,向容器内缓慢加入固定液(推荐g1101)浸没组织终止染色反应。样本需避光保存。
4.拍照前取出组织,用滤纸吸干固定液,根据需要用照相机拍照。
注意事项
1.染色后的样本易褪色,需尽快拍照。
2.为了您的安全和健康,操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。
种子ttc染色液的正确使用方法
关键词:水浴锅