关键词:大花蕙兰;组织培养;植物激素
大花蕙兰(cymbidium)是兰科兰属中一部分大花附生种及其杂交种的统称,属复茎地生兰或半附生兰,原产地在喜马拉雅山脉及东南亚高山上,是世界五大重要商品兰花之一,近几年在我国花卉市场上流行的高档室内盆栽花卉,具有极高的观赏价值,株型高大雄伟,花大而多,色彩鲜艳。由于大花蕙兰多为杂交种,种子繁殖无法保持其品质特性,其结实率也相当低,分株能力弱,因而繁殖系数低,繁殖速度慢,远远不能满足商品化生产的需求,而采用组织培养方法进行原球茎增殖可以达到工厂化生产目的。试验研究植物激素对大花蕙兰组织培养快速繁殖的影响,并成功地建立了快繁体系,可以用于工厂化育苗。
1材料与方法
1.1材料
大花蕙兰采自河南农业大学兰花园中fn4品种,切取健康饱满10~15cm长的芽,剥去外部叶片直到5mm大小,消毒处理后作为外植体诱导材料。
1.2植物激素对原球茎诱导的影响
以ms为基本培养基,6-ba设0.5、1.0、1.5、2.0mg/l(单位下同)4个浓度水平,naa浓度为0.2mg/l,培养基均附加香蕉汁100g/l,活性炭0.5g/l,每处理接10瓶,每瓶接1个茎尖,培养30d后,调查原球茎诱导率。
1.3植物激素对原球茎增殖及幼苗分化的影响
将诱导的原球茎分别接种于下列不同培养基中:①ms+6-ba1.0+naa0.1;②ms+6-ba1.0+naa0.5;③ms+6-ba1.5+naa0.1;④ms+6-bal.5+naa0.5;⑤ms+6-ba2.0+naa0.1;⑥ms+6-ba2.0+naa0.5,以上培养基均加入香蕉汁130g/l,活性炭1.0g/l。每瓶接种10个原球茎,每处理10瓶,培养40d后,调查增殖系数及成苗数。
1.4植物激素对幼苗生根的影响
将原球茎增殖及幼苗分化培养中高于2cm的幼苗切出,转接到下列生根壮苗培养中:①1/2ms+6-ba0.1+naa0.5;②1/2ms+6-ba0.3+naa0.5;③1/2ms+6-ba0.5+naa0.5;④1/2ms+6-ba1.0+naa0.5,每种培养基均附加香蕉汁150g/l,活性炭1.5g/l。每瓶接20个幼苗,每处理10瓶,30d后统计生根率及生长情况。以上ms培养基中白糖浓度为30g/l,1/2ms培养中的白糖浓度为20g/l,琼脂为7g/l,ph值为5.3。培养条件:温度为24~26℃,光照强度为1000~1800lx,光照时间12~14h/d。
2结果与分析
2.1植物激素配比对原球茎诱导的影响
从表l可以看出,随着6-ba浓度的增大,原球茎诱导率逐步增高,在6-ba1.5时达到最大,6-ba浓度再增大,原球茎诱导率下降,生长中发现细胞分裂素低浓度形成原球茎慢,并且诱导出原球茎数目少,高浓度形成愈伤多,原球茎少。在培养基ms+6-ba1.5mg/l+naa0.2mg/l+香蕉汁100g/l+活性炭0.5g/l原球茎诱导率达到90%,并且每个茎尖分化出4~5个原球茎。
2.2植物激素对原球茎增殖及幼苗分化的影响
大花蕙兰原球茎在增殖的过程中有幼苗的分化,长时间不转接,会形成很多苗,因此增殖与幼苗分化同时进行。合理的激素配比会达到理想增殖与成苗。从表2可以看出,随着细胞分裂素的增大,原球茎增殖系数也增大,但幼苗分化数却随着降低,综合考虑增殖与成苗,培养基④最好,因此最佳增殖及幼苗分化培养基是ms+6-ba1.5mg/l+naa0.5mg/l+香蕉汁130g/l+活性炭1.0g/l。
2.3植物激素对幼苗生根的影响
幼苗接在4种不同的生根培养基上均能生根,随着细胞分裂素浓度的增大,生根率逐渐降低,说明细胞分裂素对生根有一定的促进作用,但浓度加大引起增殖影响生根,培养基①生根率高,生根条数多,苗长得好。故生根壮苗最佳培养基是1/2ms+6-ba0.1mg/l+naa0.5mg/l+香蕉汁150g/l+活性炭1.5g/l。
3小结与讨论
植物激素中的细胞分裂素6-ba和生长素naa对大花蕙兰fn4组织培养快速繁殖影响很大。原球茎最佳诱导培养基是ms+6-ba1.5mg/l+naa0.2mg/l+香蕉汁100g/l+白糖30g/l+活性炭0.5g/l+琼脂7.0g/l,原球茎诱导系数可达到4~5。原球茎增殖及幼苗分化培养基是ms+6-ba1.5mg/l+naa0.5mg/l+香蕉汁130g/l+活性炭1.0g/l+白糖30g/l十琼脂7.0g/l,探索最佳增殖与幼苗分化培养基中激素配比对大花蕙兰fn4工厂化育苗有很大意义。生根壮苗培养基1/2ms+6-ba0.1mg/l+naa0.5mg/l+香蕉汁150g/l+活性炭1.5g/l+白糖20g/l+琼脂7.0g/l。