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elisa分析检测试剂盒生产方法具体有哪些

2024/12/5 0:42:27发布20次查看
elisa分析检测试剂盒生产方法具体有哪些
1、从披针叶黄华种子中提取
a、称取披针叶黄华种粒粉末 500 g,将粉末置于锥形瓶中;用 1000 ml 95 %的乙醇浸取 ,用盐酸调节其 ph 值至酸性,搅拌 5 h ,过滤得溶液;用萃取该溶液 3 次,每次用 100 ml,将得到的水相溶液用10%的 koh 调节 ph =10,再用萃取该碱性溶液,并与前 3 次萃取所得的合并;用盐酸溶液萃取,静置、分层后保留水相,弃去有机相.用 10%的 koh 溶液调节水溶液至 ph =10 后;用萃取,将得到的有机相用无水硫酸钠干燥,过滤后蒸干,得到粗碱 2.68 g,用丙酮重结晶,干燥后得本品。
b、称取披针叶黄华种粒粉末 500 g,在锥形瓶中用 25 %~ 28 %的氨水碱化18 h ,将碱化后的粘稠物倾入三口瓶中,加入回流,在粘稠物中加入甲醇, 使粘稠物变为分散相;离心得到 3 层溶液(上层为甲醇相,中层为杂质 ,层为相);甲醇相碱化后用提取,将 2 次得到的合并,用 2%的盐酸溶液萃取,分离,调节水相至中性并浓缩得到絮状沉淀,过滤该絮状沉淀,,将滤液碱化,用萃取该碱性溶液2 次 ,合并 2 次的萃取液;将溶液干燥 、过滤 、蒸干,得到粗碱 4 .4 g .将粗碱用丙酮重结晶, 干燥 , 得到针状晶体 2.14 g ,浓缩滤液后再次重结晶、干燥得本品。
2、从沙冬青种子中提取
取沙冬青种子干粉500g,用甲醇70℃水浴回流提取6次,合并甲醇液,减压回收溶剂得浸膏,挥干至恒重,浸膏用盐酸处理后得酸水液,酸水液先用萃取数次,以除去部分色素,弃去液,然后酸水液用氢氧化钠调ph至9~11,再用萃取得本品。
3、从毒豆中提取
a、1 公斤种子粉末,以10%koh 溶液碱化后以进行渗滴或连续提取器至提取*;提取液回,残余物加入500 毫升盐酸过滤,滤液用活性炭脱色后过滤;活性炭上吸附的金雀花碱以热草酸溶液洗脱,酸液合并,以10%koh 溶液碱化后 以提取;液以无水硫酸钠脱水后浓缩,于浓缩液中加入沸程 30~60℃的石油醚,金雀花碱呈微黄白色沉淀析出,滤后于80°干燥。
b、种子粉末以苯与石油醚依次处理,脱脂粉末置空气中以除尽石油醚,然后以10%koh 溶液碱化,并以提取,余同a法处理。
c、将a法中脱脂后的酸水溶液加mayer氏试剂,金雀花碱生成四碘汞盐析出。将此沉淀与水共研细,以硫化钠处理使复盐分解,金雀花碱游离,滤去硫化汞沉淀,酸水溶液加氢氧化钾溶液碱化,以提取,余同a法处理。
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