1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;
2)干烤消毒140度2小时以上;
2 无菌工作台先清洗后用75%酒精擦洗洁净，紫外线照耀40分钟以上;各种培育板照耀3小时以上;
3. 培育基(ph7.2)和血清配制好后要做无菌实验:将血清按10%参加培育基内，用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取*培育基5-10ml置培育箱内培育2-3天，肉眼见无污浊或沉淀等异物。分装后置4度保存;
4.消化液(ph7.8)或其它参加液，使用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌，分装成支置-20度保存;
5. 培育箱应先用清水清洗后用75%酒精擦洗一遍(如有紫外线的应照耀1小时以上，如有高温灭菌的应按程序来菌)。至少每月一次。
6. 进入操作时应留意先清洗双手及手腕，然后用75%酒精擦洗，操作时留意无菌台内空间层次。手及物品不要在暴露的瓶口上方来往，如果数量较多，培育瓶应放在与酒精灯平行当地便于操作，瓶与瓶之间应相隔必定的距离，开瓶(盖)时应先用75%酒精重复擦洗或用灯烧，翻开后使用灯先烧口，然后烧盖。用完后同样操作。整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点。