pd-1/pd-l1分子是目前免疫检查点领域倍受关注的靶点。截止 2017年底，美国食品（food and drug administration，fda）批准了3个pd-l1抗体，分别为罗氏的atezolizumab、阿斯利康的durvalumab和辉瑞/默沙东的avelumab，适应症包括非小细胞肺癌、 尿路上皮癌以及merkel细胞癌等少见癌种；国内也有10多家药企布局了该靶点抗体的研发。使用流式颗粒成像分析法的flowcam 8100可以帮助用户对配方中的不溶性微粒进行检测。
flowcam具备高灵敏度，高质量的颗粒图像，精确的浓度检测和直测粒径等性能，从一次实验结果中就能够获得“颗粒有多少”，“颗粒有多大”，“颗粒是什么”等信息。
目的：研究建立抗程序性死亡受体配体 1（programmed cell death protein ligａnd 1，pd-l1）单抗的质量控制方法。
方法：利用成像毛细管等电聚焦电泳（imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis，icief）、肽图对抗 pd-l1 单抗进行鉴别；利用还原 / 非还原十二烷基磺酸钠毛细管电泳 （capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate，ce-sds）、分子排阻高效液相色谱（size exclusion-high performance liquid chromatography，sec-hplc）、离子交换高效液相色谱（ion exchange-high performance liquid chromatography，iec-hplc）对抗 pd-l1 单抗的纯度进行控制；利用细胞结合抑制法和转基因细胞法测定抗 pd-l1 单抗的活性；利用光阻法和液流成像分析法对不溶性微粒进行检测和分析。
结果：抗 pd-l1 单抗的 icief 检测结果具有特征性主峰，肽图检测具有相应特征峰，起到很好的鉴别作用。还原 ce-sds 的轻链与重链峰面积之和的百分比为（98.37±0.21）%，非还原 ce-sds 主峰峰面积百分比为（96.33±0.15）%；sec-hplc 单体的峰面积百分比为（99.43±0.02）%；iec-hplc 酸性区峰面积百分比、主峰峰面积百分比、碱性区峰面积百分比分别为（13.63±0.40）%、（80.00±0.36）%、（6.37±0.15）%。细胞结合抑制法与转基因细胞法的活性检测均呈现剂量反应曲线，反映抗 pd-l1 单抗剂量依赖性地阻断程序性死亡受体 1（programmed cell death protein 1，pd-1）与 pd-l1 的结合及后续的生物学效应。光阻法检测≥ 10 μm 及≥ 25 μm 的不溶性微粒数分别为（1.33±0.58）粒·ml -1 和（0.00±0.00）粒·ml -1 ；液流成像分析法检测 2~10 μm、≥ 10 μm及≥ 25 μm 的微粒数分别为（1 243.67±242）粒·ml -1 、（45.67±16.07）粒·ml -1 和（10.00±5.00）粒·ml -1 ，其中，蛋白聚体占 87.45%，非蛋白聚体占 12.55%。
图 1 抗 pd-l1 单抗参比品（a）与样品（b）的 icief 代表图谱
图 2 抗 pd-l1 单抗参比品（a）与样品（b）的肽图代表图谱
讨论：研究建立了抗 pd-l1 单抗的多种质控方法，为国内抗 pd-l1 单抗的质量检测提供了参考依据。
郭莎，王开芹等，抗 pd-l1 单抗的质量控制研究，药物分析杂志，2019，39（1）：13-22
fluid imaging technologies(flowcam)公司成立于1999年美国缅因州斯卡伯勒市，其研发并生产的flowcam系列仪器是将流式细胞法组合到数字成像显微镜中，基于图像分析法的流式动态成像颗粒分析仪，它使颗粒分析变得更快，更简单。具有革新意义的flowcam系列仪器被广泛应用于研发和质量控制，应用涉及多个领域。
流式颗粒成像分析系统flowcam®8000系列具有以下优点。
1.测量粒度和颗粒形状-对每个颗粒成像后都可以获得30多种形态学测量结果。
2.快速提供具有统计意义的结果-用户可在过程种观察到每分钟数以万计的颗粒。
3.提供的成像质量和基于成像法的测量参数-可以看到快速和准确的，可由定量数据证明的检测测量结果。
4.自动化的，可建模的，具有统计学意义的 - 基于自动识别统计软件 - 可将不同的颗粒进行分门别类，从而节省时间。